名稱 PCR Reaction Kit (2000bp) | PCR反應(yīng)試劑盒(2000bp)
規(guī)格 20T
存儲 -20℃，有效期一年。


產(chǎn)品簡介 

本試劑盒包含完成PCR反應(yīng)所需全部試劑，可進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)的教學(xué)和科研。其中模板為質(zhì)粒DNA；引物為根據(jù)質(zhì)粒DNA序列設(shè)計的上、下游引物；2×Taq PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)的增強(qiáng)劑和優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑。使用時，只需補(bǔ)加實(shí)驗(yàn)所需的引物和模板后即可進(jìn)行PCR反應(yīng)，可限度的減少人為誤差，具有快速簡便、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。

使用本試劑盒進(jìn)行PCR反應(yīng)后，PCR產(chǎn)物大小應(yīng)為2000bp。

試劑盒組成 
組成 濃度 體積
模板 10 ng/μl 30 μl
上游引物（2000 FW） 10 μM 30 μl
下游引物（2000 RV） 10 μM 30 μl
2×Taq PCR MasterMix(含染料) - 2×500 μl
去離子水 - 1 ml


實(shí)驗(yàn)步驟 

1. 冰浴中徹底融化模板，引物和2×Taq PCR MasterMix，混勻后快甩離心將溶液收集到管底。

2. 按照下表在0.2ml PCR管中制備反應(yīng)體系：


/ 50μl反應(yīng)體系
上游引物（2000FW） 10μM 1 μl
下游引物（2000RV） 10μM 1 μl
模板 1 μl
2×Taq PCR MasterMix 25 μl
水 22 μl
 
3. 快甩離心將反應(yīng)液收集到管底。

4. PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話，補(bǔ)加25μl礦物油。

5. PCR儀上執(zhí)行以下程序：

步驟 溫度 時間 循環(huán)數(shù)
初始變性 94℃ 5 min 1
變性 94℃ 30 sec 30  
退火 54℃ 30 sec
延伸 72℃ 2 min
最后延伸 72℃ 5 min 1
 
6. 反應(yīng)完成后，取5ul反應(yīng)液，1％瓊脂糖凝膠電泳，觀察條帶情況。