名稱 CTAB抽提液 / CTAB Extract Solution

規(guī)格 500mL

存儲(chǔ) Store at RT，有效期24個(gè)月

試劑組分 

試劑(A): CTAB抽提液----500ml---Store at RT

試劑(B): 2-ME----10ml----Store at RT away from light

自備材料：1、 液氮/研缽或勻漿器；2、 恒溫箱或水浴鍋；3、 氯仿/異戊醇24:1；4、75%乙醇；6、離心管；

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

CTAB是一種陽離子去污劑，具有從低離子強(qiáng)度的溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性，在這種條件下，蛋白質(zhì)和中性多聚糖仍留在溶液里，在高離子強(qiáng)度的溶液里，CTAB與蛋白質(zhì)和大多數(shù)酸性多聚糖以外的多聚糖形成復(fù)合物，只是不能沉淀核酸。因此，CTAB可以用于從大量產(chǎn)生粘多糖的有機(jī)體如植物以及某些革蘭氏陰性菌（包括E.coli的某些株）中制備純化DNA 。

從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是經(jīng)典的植物DNA提取法，可以用于多種不同類型植物樣品DNA的提取，獲得的量很高，但是純度一般，但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。CTAB抽提液的有效成分主要由CTAB、氯化鈉、EDTA等組成，附送 2-ME，臨用前加入2-ME，使其更有效，更穩(wěn)定。

使用參考 

1、 取5ml或適量CTAB抽提液，按CTAB抽提液：2-ME=50：1的比例混勻，置于15ml或其它規(guī)格的離心管中，60℃預(yù)熱。

2、稱取1.0~1.5g或適量新鮮植物組織或葉片，用預(yù)冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器，將新鮮植物組織或葉片粉碎成細(xì)粉末，將冷凍的組織轉(zhuǎn)移至離心管中。

3、向粉碎的組織中按4~5ml/g加入預(yù)熱的CTAB抽提液，充分混勻，65℃溫育15~60min，并不時(shí)混勻。

4、加入等體積24:1氯仿/異戊醇，顛倒充分混勻，8000g離心5min~10min，回收上層水相（即上清液，該上清液中含有所需DNA）。

5、轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，加入1/2~2/3體積預(yù)冷的異丙醇，輕輕混勻，室溫靜置使核酸沉至管底。如果觀察不到沉淀，可在室溫下靜置數(shù)小時(shí)至過夜。

6、 2000g離心2min，輕輕棄上清液。

7、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇，室溫靜置20min，4000g離心10min，輕輕棄上清液。

8、自然干燥DNA，加入適量去離子水或TE緩沖液，低溫保存。

注意事項(xiàng) 

1、 如果每次的使用量很小，可以適當(dāng)分裝后再使用。

2、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

CTAB Extraction Buffer is a widely-used reagent used to isolate DNA from plant tissues.  Polysaccharides and polyphenols are problematic contaminants associated with DNA isolated from plants.  CTAB Extraction Buffer effectively eliminates polysaccharides and polyphenols by employing the cationic detergent CTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide or cetyltrimethylammounium bromide), and the polyphenol binding agent, Polyvinylpyrrolidone. 

Traditional CTAB protocols typically require the homogenization of plant samples in CTAB Extraction Buffer prior to centrifugation to pellet debris and polysaccharides. The supernatant is then extracted using chloroform, and DNA is precipitated with alcohol.  Isolated DNA is typically very clean.

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