名稱 Hoechst 33342 染色液
規(guī)格 10mL | 50mL
存儲(chǔ) -20℃避光保存，一年有效。


產(chǎn)品簡(jiǎn)介 

Hoechst 33342，也稱bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式為C27H28N6O·3HCl·3H2O，分子量為615.99，CAS Number 23491-52-3。
Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst 33342染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33342也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
Hoechst 33342的激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，發(fā)射波長(zhǎng)為460nm；Hoechst 33342和雙鏈DNA結(jié)合后，激發(fā)波長(zhǎng)為350nm，發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。

本Hoechst 33342染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。


使用方法 

1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織：

a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33342染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33342染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。


2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織：

a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33342染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。

注意事項(xiàng) 

1）本Hoechst 33342 染色液的濃度經(jīng)過優(yōu)化，確?？梢詽M足各種常規(guī)染色的需要。如需使用特定濃度的Hoechst 33342，請(qǐng)選購(gòu)Phygene的Hoechst 33342 (PH0527)。
2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)?；罴?xì)胞或組織染色后宜立即觀察。
3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4）Hoechst 33342對(duì)人體有害，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
5）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。