名稱
白細(xì)胞裂解液
White Cell Lysis Solution
規(guī)格
100mL
保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。
自備試劑
Tris 飽和酚、氯仿、乙酸鈉溶液、乙醇、TE 緩沖液等
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品為即用型白細(xì)胞裂解溶液，可以用于裂解分離純化好的血液白細(xì)胞， 用于 DNA 提取、RNA 提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
使用參考
下面以 DNA 提取為例：
1. 取新鮮抗凝血 5 mL，在 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中用紅細(xì)胞裂解液裂 解紅細(xì)胞（紅細(xì)胞裂解液有幾種配方，用戶需要根據(jù)所選產(chǎn)品的使用手冊(cè)進(jìn) 行操作，這里不列出每種的詳細(xì)步驟），也可以直接 2500 rpm 離心 5 分鐘后 取白細(xì)胞層到一新的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中。
2. 在所得的白細(xì)胞沉淀中或所得白細(xì)胞層溶液中加自備的生理鹽水使得白細(xì)胞 的終體積為 2 mL。
3. 加 1 mL 的本產(chǎn)品，混勻后 55℃ 保溫 3 小時(shí)，其間輕輕振搖數(shù)次。
4. 加入 3 mL 自備的 Tris 飽和酚，輕輕震搖 5 分鐘，使得水相和酚相充分分開。
5. 3500 rpm 離心 15 分鐘，上層水相含 DNA，中間白色層為蛋白質(zhì)，下層為 酚相。
6. 將非常粘稠的含 DNA 的上清液轉(zhuǎn)移到一干凈的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心 管中。
7. 再用 Tris 飽和酚重復(fù)上面的抽提步驟，直到離心后中間層沒有白色的蛋白出 現(xiàn)為止。
8. 在上清液中加入等體積的自備的氯仿，輕輕震搖 5 分鐘，3500 rpm 離心 5 分鐘，轉(zhuǎn)移上清液到一干凈的 10 mL 或 15 mL 的塑料離心管中。此步可以 除去殘留的酚。
9. 在上清液中加入 0.1 倍體積的自備的 3 M 乙酸鈉溶液（pH 5.2）和 2 倍體 積的無水乙醇，輕柔顛倒混勻，將出現(xiàn)絮狀的 DNA 沉淀。
10. 用移液槍頭將 DNA 沉淀挑取出來，轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 的塑料離心管中，用 75% 的乙醇浸泡 2 次。此操作可以去除 DNA 中殘留的鹽離子。
11. 轉(zhuǎn)移 DNA 沉淀到一個(gè) 1.5 mL 的塑料離心管中，空氣中放置 10 分鐘左右待乙醇揮發(fā)后，加入 0.5 mL 自備的 TE 緩沖液溶解 DNA，4℃放置待用。
注意事項(xiàng)
僅供實(shí)驗(yàn)室科研使用！
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