基于國際學術界公認的標準流程，維洛信現(xiàn)提供介導RNA干擾的慢病毒制備服務。我們采用第三代包裝系統(tǒng)系統(tǒng)在293T細胞中進行慢病毒的生產(chǎn)與包裝，并建立了完善的純化和質(zhì)控方法，生產(chǎn)的慢病毒顆?？芍苯討糜诟黝愺w內(nèi)體外試驗。
RNA干擾（RNA interference, RNAi）是借助雙鏈RNA（dsRNA）引發(fā)的同源mRNA高效特異性降解、導致基因沉默的現(xiàn)象。RNAi技術即為在靶細胞中導入外源dsRNA，生成小分子干擾RNA（siRNA）以達到特異性剔除或沉默某個基因的表達。將針對siRNA設計的shRNA裝載入慢病毒載體中，進而高效感染細胞或動物，是人工RNAi的一項主要技術。借助慢病毒的感染能力，不僅宿主細胞范圍大大擴大，shRNA也能夠更加高效、穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導入細胞，實現(xiàn)長期穩(wěn)定的RNAi效果。
慢病毒優(yōu)勢：
1. 廣泛宿主細胞：與逆轉(zhuǎn)錄載體不同，能夠感染分裂期與靜止期細胞；包膜質(zhì)粒使用皰疹病毒VSVG蛋白，宿主范圍更廣，包括神經(jīng)元細胞、腫瘤細胞、心肌細胞、干細胞等多種類型的細胞。
2. 極強感染能力：慢病毒載體具有極高的感染效率，尤其適用于難轉(zhuǎn)染的神經(jīng)元細胞、干細胞、原代細胞和其他不分化細胞。
3. 長期穩(wěn)定表達：外源基因整合入基因組，實現(xiàn)持久性表達，可應用于構(gòu)建穩(wěn)定細胞系、制備轉(zhuǎn)基因動物等。
4. 低免疫原性：體內(nèi)實驗不易造成非特異性反應與免疫抑制。
5. 高安全系數(shù)：尚未發(fā)現(xiàn)對人的致病性，已被應用于臨床治療；采用三質(zhì)粒包裝系統(tǒng)，去除致病基因和輔助序列，包裝質(zhì)粒和載體質(zhì)粒盡量降低同源性，進一步提高了生物安全性。
服務流程：
1. 方案溝通
2. 基因克?。横槍δ康幕騉RF設計3-4個靶點，將對應shRNA構(gòu)建入我們的專有慢病毒轉(zhuǎn)移質(zhì)粒，測序驗證
3. 病毒包裝：三代慢病毒包裝系統(tǒng)（轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pLV-MNG + 包裝質(zhì)粒 + 包膜質(zhì)粒）共轉(zhuǎn)染入293T細胞
4. 收毒：48 h、72 h孵育后收獲培養(yǎng)上清
5. 純化濃縮：超速離心+超濾， 去除雜質(zhì)蛋白和DNA；根據(jù)不同要求，我們還可應用切向流過濾、離子交換層析、蔗糖梯度離心等方式進一步純化與濃縮
6. 質(zhì)量控制：
- 多重酶切質(zhì)粒鑒定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 細胞轉(zhuǎn)導檢測（帶有熒光標簽）
- qPCR檢測病毒滴度
交付內(nèi)容：
定制慢病毒顆粒
對照病毒（可用于轉(zhuǎn)導測試）
詳細實驗報告
維洛信慢病毒平臺：
1. 三代慢病毒包裝系統(tǒng)與嚴格制備工藝，力求獲取滴度、活性、純度與一致性的慢病毒產(chǎn)品
2. 多種優(yōu)化啟動子（CMV, H1, U6等）與報告基因（EGFP、mCherry、EYFP等）或藥篩基因（Neo, Puro, Hygromycin等）可供選擇，滿足您的不同需求
3. 滴度高：維洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒，滿足大部分實驗的使用要求
4. 靈活生產(chǎn)：我們提供體外應用級別與體內(nèi)應用級別各種規(guī)格的病毒（小規(guī)格、中規(guī)格、大規(guī)格）的制備服務
5. 具有競爭力的價格與貨期
了解更多慢病毒服務，請撥打137-1756-5893咨詢我們。
關鍵字： RNA干擾慢病毒制備
北京維洛信生物科技有限公司成立于2019年，是北京百泰派克生物科技有限公司旗下病毒技術服務平臺，主要為國內(nèi)外各各科研院所，高校，藥企，生物工程類企業(yè)提供載體構(gòu)建、病毒包裝等生物學技術服務與產(chǎn)品?；谙冗M的腺病毒、腺相關病毒與慢病毒技術平臺，我們致力于快速、高純度、高滴度、高感染活力的病毒顆粒制備與生產(chǎn)，并結(jié)合客戶需求與應用領域，定制高效、高性價比的一站式服務。