AarI限制性?xún)?nèi)切酶能夠識(shí)別CACCTGC(4/8)^位點(diǎn),在其特定的緩沖體系(+oligo)中于37°C達(dá)到切割效果。Thermo Scientific傳統(tǒng)限制性?xún)?nèi)切酶產(chǎn)品包含了大量的高品質(zhì)內(nèi)切酶,這些酶經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可在五種緩沖液體系中的其中一種中進(jìn)行酶切,此外,還隨酶提供通用Tango緩沖液,以便進(jìn)行雙酶切。所有內(nèi)切酶在推薦的緩沖液和反應(yīng)條件下都具有100%的活性。為保證內(nèi)切酶的性能穩(wěn)定,Thermo Scientific限制性?xún)?nèi)切酶反應(yīng)緩沖液還預(yù)先混入了BSA,以增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性并結(jié)合可能存在于DNA制備產(chǎn)物中的污染物。 特點(diǎn): ? 優(yōu)異的質(zhì)量—嚴(yán)格的質(zhì)量控制和業(yè)內(nèi)領(lǐng)先的生產(chǎn)流程 ? 使用顏色標(biāo)記的五大便捷緩沖系統(tǒng) ? 包含適于雙酶切的通用型Tango緩沖液 ? 反應(yīng)緩沖液中預(yù)先混入BSA ? 種類(lèi)齊全,特異性限制性?xún)?nèi)切酶的廣泛選擇 應(yīng)用 ? 分子克隆 ? 限制性酶切位點(diǎn)作圖(Restriction site mapping) ? 基因分型 ? Southern blotting ? 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP) ? SNP 注意事項(xiàng):關(guān)于甲基化敏感度,請(qǐng)參見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明。如需使用AarI達(dá)到切割目的,至少需要兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)。在反應(yīng)混合物中加入含有AarI識(shí)別序列的0.5 μM寡聚核苷酸能夠顯著提升DNA的切割效果,特別是針對(duì)那些具有單一AarI位點(diǎn)的DNA而言。不過(guò)某些AarI的底物很難達(dá)到完全的切割效果。使用AarI進(jìn)行10倍以上的過(guò)度消化可能導(dǎo)致星活性的出現(xiàn)。AarI仍可能會(huì)與切割后的DNA結(jié)合。這一特性的可能導(dǎo)致電泳時(shí)DNA條帶發(fā)生位移。為了避免非典型的DNA條帶粗線,請(qǐng)使用6X DNA上樣染料與SDS溶液制備樣品,或在電泳前于SDS存在的條件下加熱消化后的DNA。
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