產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,DTT,溴酚藍,緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負電荷,這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時間。
使用說明:
1、請按每30微升蛋白樣品加入10微升上樣緩沖液的比例(4倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2、混勻后,100℃水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。
3、冷卻至室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
注意事項:
1、聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在30kd左右,?膠濃度為12%時,約在20kd左右,膠濃度為15%時,大概在10kd。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時間。
2、本試劑因含DTT,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍指示劑,PH值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態(tài)下,溶液可能會呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用。
北京索萊寶科技有限公司
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