用途:?
? ? 通過 3 周 2 針的快速免疫程序快速制備小鼠單克隆和多克隆抗體, ELISA 滴度 (Cutoff值為 0.1000)可達(dá)到 1:10000-1:100000 或更高。
備注:
? ? 常溫運(yùn)輸,2-8oC 保存,無(wú)菌取用,有效期 12 個(gè)月。(切勿凍存?。?
使用方法:
? ??1. 用生理鹽水將抗原稀釋到 2 ?倍最終濃度(按每針次 50μl ?用量配制)。備注:推薦使用的抗原用量為(1)免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次 5-20μg;(2)免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆??乖酷槾?1-5μg;(3)偶聯(lián)了載體蛋白的小分子抗原每針次 20-50μg。
? ? 5. 第 21 ?天采微量尾血進(jìn)行 ELISA ?測(cè)定,抗體滴度應(yīng)達(dá)到 1:10000-1:100000 ?或更高,隨后即可采全血或按常規(guī)方法進(jìn)行抗原沖擊免疫和脾細(xì)胞融合。
與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比,SoFastAntibody免疫佐劑具有免疫周期短、針次少、無(wú)需乳化、抗原用量低、抗體滴度高、抗體親合力高、易獲得構(gòu)象型表位的抗體等多方面優(yōu)點(diǎn),詳述如下: ? ? 1.SoFastAntibody只需兩針免疫,無(wú)論是用于單克隆還是多克隆抗體制備,與弗氏佐劑相比可減少免疫針次。 ? ? 2.SoFastAntibody通過減少免疫針次和降低每針次抗原用量,從而可大大節(jié)省總抗原用量。推薦使用的抗原用量為(1)免疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-50μg(通常為小鼠5-20μg,兔子20-50μg);(2)免疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全細(xì)菌以及病毒樣顆??乖酷槾?-10μg(通常為小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。 ? ??3.SoFastAntibody抗體產(chǎn)生快,抗體滴度高,抗體親合力高。以標(biāo)準(zhǔn)免疫程序?yàn)槔?,無(wú)論是用于單克隆還是多克隆抗體制備,只需要在三周內(nèi)進(jìn)行兩針免疫,通常在第五周即可獲得ELISA滴度(Cutoff值為0.1000)高達(dá)1:10000-1:10000000的高親合力抗體水平。 ? ? 4.SoFastAntibody不破壞抗原天然構(gòu)象,從而易于篩選獲得針對(duì)構(gòu)象型抗原表位的單克隆抗體,這是弗氏佐劑所不具備的一個(gè)重要特點(diǎn)。 ? ? 5.SoFastAntibody是一類水溶性佐劑,使用時(shí)不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過程,抗原和佐劑只需簡(jiǎn)單混合即可用于免疫動(dòng)物。 ? ? 6.SoFastAntibody使用肌肉免疫途徑,與常規(guī)小鼠單克隆抗體制備過程中使用足墊免疫或脾內(nèi)免疫相比,極大地方便了使用。 ? ??7.SoFastAntibody的一個(gè)重要用途是可方便地用于制備小鼠多克隆抗體。常規(guī)多克隆抗體制備多使用兔子,不但免疫針次多、抗原用量大和抗體產(chǎn)生慢,而且由于技術(shù)要求較高而往往需要委托專門單位制備。使用SoFastAntibody免疫佐劑,任何實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人員均可方便快速地制備小鼠多克隆抗體,標(biāo)準(zhǔn)免疫程序只需要簡(jiǎn)單地免疫5只小鼠,即可在五周后獲得1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體。(強(qiáng)烈推薦使用本佐劑制備小鼠多克隆抗體,1ml高質(zhì)量的小鼠多克隆抗體足以滿足絕大多數(shù)用戶的實(shí)驗(yàn)需求,包括用于酶聯(lián)免疫、免疫印跡、流式細(xì)胞、免疫組化和免疫沉淀等)。
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