2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride，TTC)，分子量為 334.80，分子式為 C19H15ClN4，CAS 號為 298-96-4。TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物，最初用于檢測種子生存能力，后來用于染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。TTC 是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，TTC 與正常組織中的呼吸酶反應(yīng)而呈紅色，而缺血組織內(nèi)呼吸酶活性下降，不能反應(yīng)，故不會產(chǎn)生變化呈蒼白色，該染色是一種用于評價組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法。
TTC 染色液(2%)對心肌梗死及腦組織壞死區(qū)的觀測較電鏡早 3～6h，較光鏡早 24h，多用于尸檢中的新鮮心臟組織和腦組織以及實驗動物模型早期梗死組織的染色。
其特點：①TTC 染色直接取材于新鮮組織即可染色，無需固定、包埋等步驟；②TTC 染色時間短，一般 20~30min；③TTC 染色液可重復(fù)使用，10ml 可染 20 張片子。
自備材料：1、 生理鹽水；2、 低溫冰箱；3、 4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林
使用參考( 僅供參考)：
1、 取待檢腦組織樣本(一般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦)，取出后-20℃速凍 20～30min，便于切片。
2、 將待檢腦組織切片，一般動物樣本層厚 2～3mm，人的樣本層厚 3～5mm，可連續(xù)切 4～5 張。刀在腦前極與視交叉連線中點處；第二刀在視交叉部位；第三刀在漏斗柄部位；第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間(參考:張均田主編，現(xiàn)代藥理試驗方法)。
3、 切片入 TTC Stain(2%)，避光浸染 25～35min。
4、 切片入 4%多聚甲醛或 10%中性福爾馬林中固定 4～24h。
5、 吸干組織表面清水，應(yīng)用 IPP 等圖像分析系統(tǒng)測量腦梗死面積并計算大腦梗死體積。
染色結(jié)果
正常心肌或腦組織 紅色
心肌或腦梗壞死區(qū) 蒼白色
缺血腦組織 介于紅色與蒼白色之間
注意事項
1、TTC Stain(2%)對人體有輕微刺激性，請注意小心防護。
2、取腦時應(yīng)仔細保持大腦的完整性。
3、如果染色效果不佳，應(yīng)適當延長染色時間。
4、樣本越新鮮越好，為了防止正常心肌及腦組織的酶活性減弱或消失，應(yīng)盡快染色。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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