特別提示：包括2×SYBR Green PCR Mastermix在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：2×SYBR Green PCR Mastermix
產(chǎn)品貨號：QN0949
產(chǎn)品規(guī)格：50T|200T

本產(chǎn)品為應(yīng)用SYBR Green Ⅰ染料進行Realtime PCR擴增反應(yīng)的高效預(yù)混系統(tǒng)。該預(yù)混系統(tǒng)提供了經(jīng)過優(yōu) 化的緩沖液、dNTP、HotStart Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I染料和MgCl2，使用者只需加入適量的引物、 模板和水，即可進行熒光定量PCR檢測。 該預(yù)混系統(tǒng)中的優(yōu)化緩沖液和 HotStart Taq DNA 聚合酶等可大大提高 PCR 產(chǎn)物的靈敏度和特異性。 Realtime PCR MasterMix 采用高效 HotStart Taq DNA 聚合酶，使 PCR 反應(yīng)具有更高靈敏度和特異性。 本產(chǎn)品可用于熒光 PCR 檢測，獲得靈敏、準確且可靠的結(jié)果?？蛇m合任意熒光定量 PCR 儀，如 ABI7000/7700/7900HT/7300/7500 Realtime PCR System、FTC2000、lightcycler 等。

產(chǎn)品特點：
高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶，90℃以上2min后具有擴增活性，可大大提高PCR產(chǎn)物的特異性。
高靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。
高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

應(yīng)用實例：模版：提取RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA，模版稀釋倍數(shù)102﹑103﹑104﹑105，設(shè)計的引物擴增的目的片段長度是125bp。

儲存條件：-20℃

除了2×SYBR Green PCR Mastermix,，我公司還供應(yīng)以下相關(guān)產(chǎn)品：



名稱：即用型熒光定量RT-PCR試劑盒
貨號：BTN101219
規(guī)格：50次
本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測的即用型雙酶一管式RT-PCR試劑盒，可以對靶片段進行實時定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。產(chǎn)品含有經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液組分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有一管式實時定量RT-PCR所需要的成分，用戶只需加入RNA模板和引物即可進行實時定量RT-PCR反應(yīng)，具有廣泛的用途。

產(chǎn)品特點：
1.一管式完成qRT-PCR反應(yīng)，避免樣品交叉污染，尤其適合臨床應(yīng)用。
2. 即開即用，用戶不需要單獨準備qRT-PCR所需的各種試劑。
3. 主要成分只有兩個(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix)，將加樣步驟減少到zuì低，極大降低了加樣誤差，增加了可重復(fù)性。
4. 使用范圍廣，適用于從病毒RNA到人RNA的各種RNA模板。
5.高靈敏度，每個RT-PCR體系zuì低可以檢測200拷貝的RNA分子，可擴增的模版RNA的zuì長達2000nt。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
雙酶一管式qRT-PCR Buffer，2×	750μl
MMLV-Taq Mix	100μl
RNase-free水	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。

使用方法：
1.在一干凈的無RNase的PCR管中，先加入下列成分(下面只列出樣品管的設(shè)置情況，用戶可自己根據(jù)需要設(shè)置陽性和陰性對照)：

成分	樣品
自備RNA模板(分下面三種情況)	見下
總RNA	100-500ng
或poly(A)mRNA	10-500ng
或體外轉(zhuǎn)錄得到的專一RNA	0.01pg-500ng
RNA特異性引物一(自備)	終濃度300nM(注1)
RNA特異性引物二(自備)	終濃度300nM
RNase-free水	補到10μL
雙酶一管式qRT-PCR Buffer(2×)	15μl
自備ROX(某些熒光PCR機型需要)	3μL(注2)
MMLV-Taq Mix	2μl

?注1：通常初次使用本試劑時，可用引物濃度300nM進行實驗，根據(jù)實驗結(jié)果具體情況，在200～800nM范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。引物、待檢樣品的具體加量用戶可以根據(jù)實際情況調(diào)整，同時增減RNase-free水用量，保證總反應(yīng)體積不變即可。
?注2：如果使用ABI公司的7500，7700和7900三種型號的熒光PCR儀器，則需用自備的ROX進行Ct值校正。對ABI 7700和7900，ROX的zuì佳濃度為1×(即在每30μl反應(yīng)體系中加3μl 10×ROX)。對ABI 7500，ROX的zuì佳濃度為0.05-0.1×(每30μL反應(yīng)體系加0.3μL 10×ROX；也可將10×ROX稀釋到1×，然后每個反應(yīng)體系加入3μL 1×ROX)。ROX會在溶解曲線中產(chǎn)生噪音，因此，如果出現(xiàn)了雜峰，將軟件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”選項取消打勾，然后重新分析數(shù)據(jù)。對于iCycler IQ，MJ Opticon，MJ Chromo4，MX3000，MX4000，RotorGene3000，RotorGene 6000和LightCycler 480等型號的熒光PCR儀器，ROX不是必須的，但加入的話也不會影響整個PCR分析。
2. 輕柔混合均勻后放入PCR儀中進行熒光定量RT-PCR。
3. 設(shè)定RT-PCR反應(yīng)條件時，一般將RT的條件設(shè)定成42℃ 30分鐘，后接94℃變性5分鐘，然后進入PCR循環(huán)(PCR參數(shù)將根據(jù)自備引物的Tm值和PCR產(chǎn)物長度由用戶自行決定注)、zuì后72℃ 5分鐘。并在退火或延長步驟中記錄熒光信號。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在沒結(jié)合DNA時，zuì大吸收光譜在471nm，結(jié)合DNA時的zuì大吸收光譜在500nm，zuì大發(fā)射光譜在530nm。