一、生物技術級:
截留分子量較精準,采用無重金屬和硫化物的工藝流程。
因而膜純度較高,適用于對截留分子量和膜純度要求嚴格的應用。有纖維素酯(CE)和再生纖維素(RC)兩種材料的膜。
1、CE膜: 預濕型的,用的0.05%NaN?溶液濕包裝,使用前用去離子水沖洗
2、RC膜:干型包裝(使用前用50%的乙醇水浸泡約6小時,再用純水沖洗)
二、標準級
截留分子量精確,金屬雜質(zhì)含量極低,是實驗室常規(guī)脫鹽、換液以及大分子純化的理想選擇。只有再生纖維素(RC)材料的一種膜。
1、預濕型的,用的0.05%NaN?溶液濕包裝,使用前用去離子水沖洗
2、干型包裝(使用前用50%的乙醇水浸泡約6小時,再用純水沖洗)
三、普通干型透析袋
需要預處理,處理步驟如下
(1) 把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段;
(2) 在大體積的2%(WM)碳酸氫鈉和1 mmol/L EDTA(pH8.0)沖將透析袋煮沸10分鐘;
(3) 用蒸餾水徹底清洗透析袋;
(4) 放在1 mmol/L EDTA(pH8.0沖將之煮沸10分鐘;
(5) 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋時必須戴手套;
(6) 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干浄;
實驗要求不高的可以用簡易處理方法:
在沸水中煮10分鐘即可使用。
透析袋的選擇
(1)根據(jù)樣品溶劑和確定的透析液,選擇CE或RC材料的膜
(2)根據(jù)實驗純度需求選擇生物技術級或標準級的透析袋
(3)正確選擇扁平寬度
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15cm的透析袋。
(4)根據(jù)雜質(zhì)和要保留的物質(zhì)的分子量選擇一定截留分子量的透析袋。
a.透析袋的截留分子量是指對該分子量的物質(zhì)的截留率能達到90-95%,如10000截留分子量的透析袋對于10000的物質(zhì),截留率是90-95%(5~10%會出去)
b.對于雜質(zhì),若想去除的干凈,需選擇100倍的截留分子量的透析袋,如雜質(zhì)是1000,那選擇10萬截留分子量的透析袋才能將雜質(zhì)完全去除;但同時考慮要保留的物質(zhì)的分子量;所以,要想得到純度較高的物質(zhì),就盡量選擇大ー點的截留分子量,產(chǎn)品收率會降低;若想獲得較高的產(chǎn)品收率就選擇要和保留的產(chǎn)品的分子量相同的透析袋。
注意事項
1.對于預型和甘油處理的透析袋,使用前一定要用去離子水完全沖洗掉防腐劑和甘油后使用
2.透析袋不能在純水中長期儲存,會長菌,用0.05%NaN?溶液儲存
3.樣品按推薦的單位長度容量加樣,不可多加,樣品濃度不可太大,否則容易導致膜漲破
4.樣品和透析液體積比一般是150-500
5.對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換
6.透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃
7.在適當?shù)膬Υ媲闂l件下,保質(zhì)期為兩年
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