"NB4(NB-4)細胞系|人急性早幼粒白血病細胞 HS-C0366931 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NB4(NB-4)細胞系|人急性早幼粒白血病細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 BIN-S1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2023細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:每周換液2次 MT-2細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代 PC-12(高分化)細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:多角形;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 HCC-9724細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 a-253細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NB4(NB-4)細胞系|人急性早幼粒白血病細胞 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細胞】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 L5178Y細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PAXC-003細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天傳1次 C8-D1A細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H1355[H1355]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SNU-638細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-N87細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:消化15-20分鐘。1:2。4-5天長滿。 NB4(NB-4)細胞系|人急性早幼粒白血病細胞 NPC-TW01細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HBL-100細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 C8-D1A細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 SNU-638細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NPC-TW01細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HBL-100細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 BIN-S1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H2023細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:每周換液2次 BSC40細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PAXC-002細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天傳1次 NS-1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2傳代,3天內(nèi)可長滿。 U138細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PC12細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HRGEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 JKT-1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MC116細胞系;細胞生長特性:懸浮生長 ;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:每周換液2-3次。 Y79細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:圓形,成簇生長;細胞傳代方法:1:2傳代 HN13細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HECV細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Neuro-2a[N2a]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PT-K75細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 Tca-8113[Tca8113]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RAEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCM460細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 GES1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HHUA細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1693[H1693]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 P3/ag細胞系;細胞生長特性:懸??;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HFB細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CT26WT細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KOSC-2 cl3-43細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:2.2 x 10^4 cells/ml SK-NEP-1細胞系;細胞生長特性:半貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。 NIT-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周換液1-2次 CFPAC-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3-10傳代;2-3天換液1次。 COR-L279細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LTEP sm細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SNK6細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUV-EC細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KASUMI-1細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:原粒細胞;細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。 HGC-27細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 NIE-115細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Duckembryo細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 SHG-44細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 3T6-Swissalbino細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 143TK細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H676B細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUP-T4細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H2227細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1563[H1563]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 IR983F細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H920細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MBdSMC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KM932細胞系;細胞生長特性:懸浮;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW-900細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2-3次。 VSC4.1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HP615細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NB4(NB-4)細胞系|人急性早幼粒白血病細胞 NUGC-4細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MGECs細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 B35細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCFB細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 K1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 "
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