"KU-19-19細胞系|人膀胱癌細胞
HS-C03６６６３５
細胞背景資料：膀胱癌；男性
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KU-19-19細胞系|人膀胱癌細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
VA-ES-BJ細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：３傳代，每周２次
SCC-２５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BT-４８３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代，２—３天換液一次
Walker-２５６細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
A４２７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MOLT-４細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：每周２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KU-19-19細胞系|人膀胱癌細胞
細胞生長特性：貼壁
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應用比單用效果好，預防性應用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HRC９９細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BA/F３細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：圓形；細胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
Hs６９５T細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU３５４細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GCT０４０４細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CCD-３３Co細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KU-19-19細胞系|人膀胱癌細胞
SHG４４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BHK-２１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代，每周換液１-２次。
HCC１５００細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每３-５天換液
MOLM-１３細胞系；細胞生長特性：懸浮；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１１５５[H１１５５]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs ６１１.T細胞系；細胞生長特性：混合型；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代；每周換液２-３次。
MEF(CF-１)細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１４３６細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：隨細胞的密度而增加
SW ９８２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RC-４BC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LS１８０(CL-１８７)[LS１８０]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Karpas-２９９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KYSE１５０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
L-０２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SPA-A１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２５０[H２５０]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
WISH細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
HLCL９B１０細胞系；細胞生長特性：懸?。患毎螒B(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
U８７MG細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
B９５-８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
HIMEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
EHEB細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PAEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H５９６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。
PtK１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Lncap細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；梭形；細胞傳代方法：１：２傳代
HRPEpiC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
UO３１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３-１：６傳代；２-３天換液１次。
SupT１細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：１：２傳代
RPTC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
３T３-Swissalbino細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PIG３細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CNE１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RSC-３６４細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
P３X６３Ag８細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Jurkat(clone E６-１)細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TF-１細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣 ；細胞傳代方法：維持細胞濃度在３×１０４-５×１０５ cells/ml；２-３天換液１次。
RT-１１２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TCMK-１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SCC-０９０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MES-SA細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣 ；細胞傳代方法：１：６-１：８傳代；每周２-３次。
NCI-H２１１[H２１１]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TE６７１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HRC-９９９９細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEK-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PSN１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：２-１：６傳代，２-３天換液１次。
Ramos細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
mouseHC１１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
THC８３０７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CHP-１２６細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
U３７３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
SJRH３０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代，３-４天換液１次。
KG-１細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：原粒細胞；細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
CT２６.CL２５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HAEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
C１２７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KU-19-19細胞系|人膀胱癌細胞
NCI-H２２６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
CCD ８４１ CoN細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HSC-２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HEC１-B細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LLC-PK１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
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