??????Caspase 8 活性檢測試劑盒(Caspase 8 Activity Assay Kit)是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 8酶活性或純化的caspase 8酶活性的試劑盒。 ??????Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也稱FLICE、MACH或Mch5,有時被寫作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,在細胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中被激活。Caspase?8被認為是細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中比較上游的一個caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的細胞凋亡過程中caspase?8被激活,形成一個由p18和p10組成的二聚體,進一步激活下游的caspase 4,caspase 6,caspase 9和caspase 10。 ??????本Caspase 8活性檢測試劑盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有強吸收。 ??????試劑盒中提供了caspase 8催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 8酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。 ??????本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測20個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,Ac-IETD-pNA和pNA需避光保存。 注意事項: ??????須自備可以測定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過100μl的分光光度檢測杯及相應(yīng)分光光度計。優(yōu)先考慮測定A405,如有困難可以測定A400。 ??????Ac-IETD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融,請注意適當(dāng)分裝。 ??????測定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測定試劑盒(P0006),可向碧云天訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測定蛋白濃度,以降低DTT對蛋白濃度測定的干擾。 ??????pNA(中文名為4-硝基苯胺)對人體有毒,操作時請?zhí)貏e小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
??????本試劑盒的裂解液可以和碧云天生產(chǎn)的其它caspase活性檢測試劑盒的裂解液通用,即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于碧云天其它caspase活性檢測試劑盒的檢測。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。?
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