??????Klenow?Fragment，Exo-，即沒有外切酶活性的Klenow片段，是大腸桿菌聚合酶I(E.coli.DNA polymerase I)的大片段
(Large?Fragment)缺失了外切酶活性的突變體。Klenow Fragment，Exo-保留了DNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性，但缺少完整
的Klenow酶的5'→3'和3'→5'外切酶活性。
??????特點：由于Klenow Fragment，Exo-沒有外切酶活性，其在末端補平時經(jīng)常會在3'末端額外加上1個或多個核苷酸，因此不能用于產(chǎn)生平末端而用于后續(xù)的連接。
??????用途：5'突出末端的標(biāo)記；隨機引物法進行DNA標(biāo)記；Sanger雙脫氧法進行DNA測序等。?
??????來源：由大腸桿菌表達，表達基因的來源為突變的 polA 基因片段。
??????分子量：約68kDa(單體)。
??????活性定義：37℃30分鐘內(nèi)，催化10nmol脫氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定義為1個活性單位。
??????酶活性檢測條件：67mM potassium phosphate(pH7.4)，6.7mM MgCl₂，1mM 2-mercaptoethanol，0.033mM
dATP，0.033mM dTTP，0.4MBq/ml[³H]-dTTP，62.5μg/ml poly(dA-dT)·poly(dA-dT)。
??????純度：不含DNA內(nèi)切酶，不含RNase。
??????酶儲存溶液：25mM Tris-HCl(pH7.5)，0.1mM EDTA，1mM DTT，50%(v/v)glycerol。
??????Reaction Buffer(10X)：500mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃)，50mM MgCl₂， 10mM DTT。
??????緩沖液兼容性：在碧云天的內(nèi)切酶反應(yīng)緩沖液1X O、1X R、1X Y、2X Y中的活性為100%，在1X B、1X G中的活性為100%；在碧云天的Taq、Pfu DNA polymerase和M-MuLV反應(yīng)緩沖液中的活性為100%。
??????失活或抑制：75℃加熱10分鐘或加入適量EDTA均可導(dǎo)致Klenow?Fragment，Exo-失活。金屬離子螯合劑，無機焦磷酸鹽(PPi)，大劑量的無機磷酸鹽(Pi)均對Klenow Fragment，Exo-有抑制作用。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項：?
??????酶使用時宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上，使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。?