| 產(chǎn)品編號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
產(chǎn)品包裝 |
產(chǎn)品價(jià)格 |
| D2624-1μg |
pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白) |
1μg |
888.00元 |
??????pCMV-C-DsRed是碧云天自行研發(fā)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒，用于表達(dá)C端含DsRed (Discosoma sp. red fluorescent protein，香菇珊瑚紅色熒光蛋白)標(biāo)簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動(dòng)子，可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。在多克隆位點(diǎn)的后面有一個(gè)DsRed的完整編碼序列，因此在多克隆位點(diǎn)根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達(dá)C端含有DsRed標(biāo)簽的融合蛋白。利用DsRed的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)定位，也可以利用DsRed抗體來(lái)檢測(cè)或免疫沉淀融合蛋白。DsRed與GFP沒(méi)有序列同源性，不能使用GFP抗體檢測(cè)DsRed。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。
??????pCMV-C-DsRed質(zhì)粒的主要信息如下：
|
Feature Nucleotide
|
Position
|
|
CMV promoter
|
1-602
|
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
|
Multiple cloning site
|
651-740
|
|
DsRed
|
741-1419
|
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
1478-1499
|
|
SV40 polyA signal
|
1511-1894
|
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
2032-2338
|
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bla promoter
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2363-2487
|
|
SV40 promoter
|
2507-2845
|
|
Neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2869-3661
|
|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
|
3662-4130
|
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pUC origin
|
4259-4926
|
??????pCMV-C-DsRed質(zhì)粒(4969bp)的圖譜如下：
??????pCMV-C-DsRed的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
|
SmaI
|
|
|
|
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
|
|
|
|
651
|
GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
CCGCTCTAGC
|
CCGGGCGGAT
|
CCAAGCTTCT
|
|
|
|
|
CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
GGCGAGATCG
|
GGCCCGCCTA
|
GGTTCGAAGA
|
|
|
|
EcoRI EcoRV SalI XhoI XbaI DsRed
|
|
|
|
701
|
GCAGGAATTC
|
GATATCGTCG
|
ACAGATCTCT
|
CGAGTCTAGA
|
ATGGACAACA
|
|
|
|
|
CGTCCTTAAG
|
CTATAGCAGC
|
TGTCTAGAGA
|
GCTCAGATCT
|
TACCTGTTGT
|
|
|
|
751
|
CCGAGGACGT
|
CATCAAGGAG
|
TTCATGCAGT
|
TCAAGGTGCG
|
CATGGAGGGC
|
|
|
|
|
GGCTCCTGCA
|
GTAGTTCCTC
|
AAGTACGTCA
|
AGTTCCACGC
|
GTACCTCCCG
|
|
|
|
801
|
TCCGTGAACG
|
GCCACTACTT
|
CGAGATCGAG
|
GGCGAGGGCG
|
AGGGCAAGCC
|
|
|
|
|
AGGCACTTGC
|
CGGTGATGAA
|
GCTCTAGCTC
|
CCGCTCCCGC
|
TCCCGTTCGG
|
|
|
|
851
|
CTACGAGGGC
|
ACCCAGACCG
|
CCAAGCTGCA
|
GGTGACCAAG
|
GGCGGCCCCC
|
|
|
|
|
GATGCTCCCG
|
TGGGTCTGGC
|
GGTTCGACGT
|
CCACTGGTTC
|
CCGCCGGGGG
|
|
|
|
901
|
TGCCCTTCGC
|
CTGGGACATC
|
CTGTCCCCCC
|
AGTTCCAGTA
|
CGGCTCCAAG
|
|
|
|
|
ACGGGAAGCG
|
GACCCTGTAG
|
GACAGGGGGG
|
TCAAGGTCAT
|
GCCGAGGTTC
|
|
|
|
951
|
GCCTACGTGA
|
AGCACCCCGC
|
CGACATCCCC
|
GACTACATGA
|
AGCTGTCCTT
|
|
|
|
|
CGGATGCACT
|
TCGTGGGGCG
|
GCTGTAGGGG
|
CTGATGTACT
|
TCGACAGGAA
|
|
|
|
1001
|
CCCCGAGGGC
|
TTCACCTGGG
|
AGCGCTCCAT
|
GAACTTCGAG
|
GACGGCGGCG
|
|
|
|
|
GGGGCTCCCG
|
AAGTGGACCC
|
TCGCGAGGTA
|
CTTGAAGCTC
|
CTGCCGCCGC
|
|
|
|
1051
|
TGGTGGAGGT
|
GCAGCAGGAC
|
TCCTCCCTGC
|
AGGACGGCAC
|
CTTCATCTAC
|
|
|
|
|
ACCACCTCCA
|
CGTCGTCCTG
|
AGGAGGGACG
|
TCCTGCCGTG
|
GAAGTAGATG
|
|
|
|
1101
|
AAGGTGAAGT
|
TCAAGGGCGT
|
GAACTTCCCC
|
GCCGACGGCC
|
CCGTAATGCA
|
|
|
|
|
TTCCACTTCA
|
AGTTCCCGCA
|
CTTGAAGGGG
|
CGGCTGCCGG
|
GGCATTACGT
|
|
|
|
1151
|
GAAGAAGACT
|
GCCGGCTGGG
|
AGCCCTCCAC
|
CGAGAAGCTG
|
TACCCCCAGG
|
|
|
|
|
CTTCTTCTGA
|
CGGCCGACCC
|
TCGGGAGGTG
|
GCTCTTCGAC
|
ATGGGGGTCC
|
|
|
|
1201
|
ACGGCGTGCT
|
GAAGGGCGAG
|
ATCTCCCACG
|
CCCTGAAGCT
|
GAAGGACGGC
|
|
|
|
|
TGCCGCACGA
|
CTTCCCGCTC
|
TAGAGGGTGC
|
GGGACTTCGA
|
CTTCCTGCCG
|
|
|
|
1251
|
GGCCACTACA
|
CCTGCGACTT
|
CAAGACCGTG
|
TACAAGGCCA
|
AGAAGCCCGT
|
|
|
|
|
CCGGTGATGT
|
GGACGCTGAA
|
GTTCTGGCAC
|
ATGTTCCGGT
|
TCTTCGGGCA
|
|
|
|
1301
|
GCAGCTGCCC
|
GGCAACCACT
|
ACGTGGACTC
|
CAAGCTGGAC
|
ATCACCAACC
|
|
|
|
|
CGTCGACGGG
|
CCGTTGGTGA
|
TGCACCTGAG
|
GTTCGACCTG
|
TAGTGGTTGG
|
|
|
|
1351
|
ACAACGAGGA
|
CTACACCGTG
|
GTGGAGCAGT
|
ACGAGCACGC
|
CGAGGCCCGC
|
|
|
|
|
TGTTGCTCCT
|
GATGTGGCAC
|
CACCTCGTCA
|
TGCTCGTGCG
|
GCTCCGGGCG
|
|
|
|
ApaI
|
|
|
|
1401
|
CACTCCGGCT
|
|
GGCCCGGTAC
|
CTTAATTAAT
|
TAAGGTACCA
|
|
|
|
|
GTGAGGCCGA
|
|
CCGGGCCATG
|
GAATTAATTA
|
ATTCCATGGT
|
??????pCMV-C-DsRed中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-DsRed)包括：
|
AclI
|
AflII
|
AgeI
|
AscI
|
AsiSI
|
BaeI
|
BbvCI
|
|
BcgI
|
BlpI
|
BmgBI
|
Bpu10I
|
BsiWI
|
BsmBI
|
BspEI
|
|
BspQI
|
BssHII
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
FseI
|
NruI
|
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
PspXI
|
SapI
|
ScaI
|
|
SgrAI
|
SpeI
|
SwaI
|
XcmI
|
XmnI
|
|
|
??????pCMV-C-DsRed中的單酶切位點(diǎn)（Restriction enzymes that cut pCMV-C-DsRed once）包括：
|
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
BbsI
|
GAAGACNN`NNNN,
|
1161
|
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1279
|
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
380
|
|
PflMI
|
CCAN,NNN`NTGG
|
1319
|
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1420
|
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
ApaI
|
G,GGCC`C
|
1420
|
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
PvuI
|
GCAGTG,NN`
|
1500
|
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1656
|
|
BstXI
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
659
|
|
MfeI
|
C`AATT,G
|
1749
|
|
SacII
|
CC,GC`GG
|
660
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1762
|
|
NotI
|
GC`GGCC,GC
|
668
|
|
BtsI
|
GCAGTG,NN`
|
1836
|
|
TspMI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1885
|
|
XmaI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2771
|
|
SmaI
|
CCC|GGG
|
682
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2839
|
|
SrfI
|
GCCC|GGGC
|
682
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2839
|
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
687
|
|
KasI
|
G`GCGC,C
|
2998
|
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
693
|
|
NarI
|
GG`CG,CC
|
2999
|
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
705
|
|
PluTI
|
G,GCGC`C
|
2998
|
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
713
|
|
SfoI
|
GGC|GCC
|
3000
|
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
717
|
|
MscI
|
TGG|CCA
|
3081
|
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
718
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3117
|
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3117
|
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3230
|
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
735
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3515
|
|
BstEII
|
G`GTNAC,C
|
881
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3681
|
|
AhdI
|
GACNN,N`NNGTC
|
919
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
3988
|
|
AfeI
|
AGC|GCT
|
1023
|
|
ApaLI
|
G`TGCA,C
|
4603
|
|
SbfI
|
CC,TGCA`GG
|
1077
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4917
|
??????pCMV-C-DsRed質(zhì)粒中推薦使用的測(cè)序引物序列如下：
??????T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
??????C-DsRed primer (852-873): 5′- TGGCGGTCTGGGTGCCCTCGTA -3′
??????pCMV-C-DsRed的全序列信息：D2624 pCMV-C-DsRed-seq.txt
??????pCMV-C-DsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果請(qǐng)參考圖1。
圖1. pCMV-C-DsRed質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后的表達(dá)效果圖。左側(cè)為明場(chǎng)照片，右側(cè)為熒光照片。
包裝清單：
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
|
D2624-1μg
|
pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)
|
1μg
|
|
D2624-100μg
|
pCMV-C-DsRed (紅色熒光蛋白)
|
100μg
|
|
—
|
說(shuō)明書(shū)
|
1份
|
保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng)： ??????
??????本質(zhì)粒未經(jīng)碧云天書(shū)面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個(gè)人或單位。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。