??????碧云天生產(chǎn)的Recombinant 16-Tag Protein (重組16標簽蛋白)是通過大腸桿菌表達的帶有His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST和EGFP共16種常見標簽的大小為68.5kD的重組蛋白,可以被16種相應的標簽抗體特異性識別,常用作16種標簽中的任何一種標簽融合表達蛋白的Western blot檢測時的陽性對照。 ??????本產(chǎn)品也常被稱作多標簽重組蛋白(Multiple-tag recombinant protein, multi-tag recombinant protein),Western標簽蛋白陽性對照(Tag protein positive control for Western blot),標簽蛋白標準(Tag protein marker/Tagged protein marker)或標簽蛋白對照(Tag protein control/Tagged protein control)等。 ??????本產(chǎn)品帶有的標簽從N端開始依次為His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST以及EGFP。GST與EGFP標簽分別含有218和239個氨基酸,可從PubMed等處查詢到其對應的蛋白序列,其余各標簽的氨基酸序列信息見下表。
??????本產(chǎn)品已經(jīng)配制在SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(1X)中,濃度約為1ng/μl,室溫融化后取約5μl直接上樣,最后即可獲得比較清晰的Western Blot檢測條帶。本產(chǎn)品經(jīng)12% SDS-PAGE電泳后,使用碧云天部分標簽抗體的Western Blot檢測效果如圖1所示。 ??????圖1. 本產(chǎn)品使用碧云天7種標簽抗體的Western Blot檢測結果圖。Recombinant 16-Tag Protein上樣量均為5μl,電泳結束后采用濕法電轉膜,將樣品轉移至PVDF膜上;封閉后PVDF膜分別采用碧云天生產(chǎn)的一抗產(chǎn)品His-tag抗體(小鼠單抗) (AH367)、HA抗體(小鼠單抗) (AH158)、AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody (AF0051)、Flag抗體(小鼠單抗) (AF519)、Myc抗體(小鼠單抗) (AM926)、GST抗體(小鼠單抗) (AG768)與GFP抗體(小鼠單抗) (AG281)于4℃孵育過夜,洗滌后PVDF膜用辣根過氧化物酶標記山羊抗小鼠lgG(H+L)(A0216)孵育1h,一抗與二抗均使用相應稀釋液按1:1000稀釋后使用;最后發(fā)光檢測時采用BeyoECL Star (P0018A),曝光時間為10秒。注意:使用不同的一抗、二抗和化學發(fā)光試劑,會有不同的檢測靈敏度,的上樣量須在實際使用時適當調節(jié)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。避免過多的反復凍融,可以適當分裝后-20℃保存。如果希望保存更長時間,可以適當分裝后-80℃保存。 注意事項: ??????本產(chǎn)品如果過多地反復凍融,可能導致蛋白降解,從而影響最終的檢測效果。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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