??????碧云天生產(chǎn)的Recombinant 16-Tag Protein (重組16標(biāo)簽蛋白)是通過大腸桿菌表達(dá)的帶有His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST和EGFP共16種常見標(biāo)簽的大小為68.5kD的重組蛋白,可以被16種相應(yīng)的標(biāo)簽抗體特異性識(shí)別,常用作16種標(biāo)簽中的任何一種標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的Western blot檢測(cè)時(shí)的陽(yáng)性對(duì)照。 ??????本產(chǎn)品也常被稱作多標(biāo)簽重組蛋白(Multiple-tag recombinant protein, multi-tag recombinant protein),Western標(biāo)簽蛋白陽(yáng)性對(duì)照(Tag protein positive control for Western blot),標(biāo)簽蛋白標(biāo)準(zhǔn)(Tag protein marker/Tagged protein marker)或標(biāo)簽蛋白對(duì)照(Tag protein control/Tagged protein control)等。 ??????本產(chǎn)品帶有的標(biāo)簽從N端開始依次為His、HA、AU1、T7、E、VSV-G、V5、AU5、S、HSV、FLAG、LUMINO、GluGlu、Myc、GST以及EGFP。GST與EGFP標(biāo)簽分別含有218和239個(gè)氨基酸,可從PubMed等處查詢到其對(duì)應(yīng)的蛋白序列,其余各標(biāo)簽的氨基酸序列信息見下表。
??????本產(chǎn)品已經(jīng)配制在SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(1X)中,濃度約為1ng/μl,室溫融化后取約5μl直接上樣,最后即可獲得比較清晰的Western Blot檢測(cè)條帶。本產(chǎn)品經(jīng)12% SDS-PAGE電泳后,使用碧云天部分標(biāo)簽抗體的Western Blot檢測(cè)效果如圖1所示。 ??????圖1. 本產(chǎn)品使用碧云天7種標(biāo)簽抗體的Western Blot檢測(cè)結(jié)果圖。Recombinant 16-Tag Protein上樣量均為5μl,電泳結(jié)束后采用濕法電轉(zhuǎn)膜,將樣品轉(zhuǎn)移至PVDF膜上;封閉后PVDF膜分別采用碧云天生產(chǎn)的一抗產(chǎn)品His-tag抗體(小鼠單抗) (AH367)、HA抗體(小鼠單抗) (AH158)、AU1-tag Mouse Monoclonal Antibody (AF0051)、Flag抗體(小鼠單抗) (AF519)、Myc抗體(小鼠單抗) (AM926)、GST抗體(小鼠單抗) (AG768)與GFP抗體(小鼠單抗) (AG281)于4℃孵育過夜,洗滌后PVDF膜用辣根過氧化物酶標(biāo)記山羊抗小鼠lgG(H+L)(A0216)孵育1h,一抗與二抗均使用相應(yīng)稀釋液按1:1000稀釋后使用;最后發(fā)光檢測(cè)時(shí)采用BeyoECL Star (P0018A),曝光時(shí)間為10秒。注意:使用不同的一抗、二抗和化學(xué)發(fā)光試劑,會(huì)有不同的檢測(cè)靈敏度,的上樣量須在實(shí)際使用時(shí)適當(dāng)調(diào)節(jié)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。避免過多的反復(fù)凍融,可以適當(dāng)分裝后-20℃保存。如果希望保存更長(zhǎng)時(shí)間,可以適當(dāng)分裝后-80℃保存。 注意事項(xiàng): ??????本產(chǎn)品如果過多地反復(fù)凍融,可能導(dǎo)致蛋白降解,從而影響最終的檢測(cè)效果。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
碧云天生物技術(shù)有限公司
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