在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞培養(yǎng)技術也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產物。因為生物產品都是從細胞得來,所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中最核心、最基礎的技術。公司是國內的細胞庫之一,迄今為止,細胞收錄背景資料清晰,活力狀態(tài)良好的細胞系達1356株,其中大部分是1999年以來從美國ATCC、德國DSMZ和日本RIKEN等分批次引進的細胞系,是全國最權威的細胞庫,為您實驗提供最可信賴的細胞。公司立足上海,輻射全國,面向世界,為國內科研細胞實驗做綿薄之力。
NCI-H446細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞生長特性:貼壁/懸浮生長,混合;細胞背景資料:該細胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,表達神經元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比,該細胞c-mycDNA序列擴增約20倍,RNA增加15倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10nM化可的松、0.005mg/ml胰島素、0.01mg/ml轉鐵
NCI-H1184[H1184]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H1944細胞系;細胞傳代方法:1:3—1:6傳代,每周換液2—3次;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SNT8細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸??;細胞背景資料:NK/T細胞淋巴瘤;女性
GP293細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
SNU-601細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
WI-38[WI38]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說,是非常好的開門教程:準備室的設備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺;配液室的設備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設備:液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統、低溫冰箱(-80℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄);必須放在無菌間的設備:離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統各20-30分鐘;實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺;實驗人員的無菌準備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
1301細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸?。患毎尘百Y料:急性T淋巴細胞白血?。慌?/div>
H22-H8D8細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:半貼壁;細胞背景資料:肝癌
OCUM-1細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞生長特性:懸浮生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H841[H841]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H2330[H2330]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H2291[H2291]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
HLAmP細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
TE7細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:食管鱗癌;男性
NCI-H1694細胞系;細胞傳代方法:3-4天換液1次;細胞形態(tài)特性:聚團懸?。患毎L特性:懸浮生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
T3T-L1細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
D283med細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
OV-1063細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:卵巢上皮細胞癌
DBTRG-05MG細胞系;細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
MRMT-1細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:乳腺癌;SD
WM35細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:黑色素瘤;女性
HPT-8|小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞
TOV-112D細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代,3-4天換液1次;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
A704細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:腎癌;男性
Hs 281.T細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代,每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
KS-1細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
COLO 741細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CTX TNA2細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:星形膠質細胞;SV40轉化;SD
GRSL細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
HCE1細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H1993[H1993]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CCC-HEH-2細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:心肌
Fox-NY細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
22Rv1細胞系;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細胞系。此細胞系表達前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激細胞生長,經westernblot檢測溶解產物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應。EGF刺激細胞生長,但TGFβ-1不能抑制細胞生長。該細胞在裸鼠中成瘤。
HELF細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長?。患毎尘百Y料:詳見相關文獻介紹
HCC-2108細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
HuT 78細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸浮;細胞背景資料:皮膚;T淋巴瘤;男性
SW1990細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:胰腺癌;男性
J45.01細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸??;細胞背景資料:急性T淋巴細胞白血??;男性
HuH-7細胞系;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CCC-HEH-2細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:心肌
MKN74細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:胃癌;女性
RPMI 1788細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸浮;細胞背景資料:B淋巴細胞;EBV轉化
MAEC細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:主動脈;內皮細胞
HLCL9B10細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸?。患毎尘百Y料:淋巴母細胞瘤
COLO 320細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
SK-MEL-1細胞系;細胞傳代方法:維持細胞濃度在1×105-2×105,每周補液2-3次;細胞形態(tài)特性:球形的;細胞生長特性:懸浮生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
PC-3[PC3]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
L78細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:肺腺
NCI-H716 [H716]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸??;細胞背景資料:盲囊腺癌;腹水轉移;男性
PtK1(NBL-3)細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NCI-H596[H596]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
MKN74細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:胃癌;女性
SUM159PT細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:乳腺癌;女性
HCM細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:心肌
KMB-17細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
C2C12細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;梭形;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:該細胞株是YaffeD,SaxelO建立的小鼠成肌細胞系的亞株。該細胞分化較快,可形成能收縮的微管,產生特異的肌肉蛋白。在骨形態(tài)形成蛋白(BMP-2)的作用下,該細胞可由成肌細胞分化為成骨細胞。檢測發(fā)現該細胞鼠痘病毒陰性。
hEM15A細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:子宮內膜間質細胞;永生化;女性
NCI-H3255細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長??;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NGEC細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:胃黏膜;上皮細胞
hFOB1.19細胞系;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達載體pUCSVisA58轉染自然流產的胎兒四肢組織,建立了此細胞系。在許可溫度33.5oC下細胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細胞極少分裂或不分裂。這些細胞具有分化為表達造骨細胞表型的成熟造骨細胞的能力。這些細胞提供了一個同質化的快速增殖模型系統,用于研究正常人造骨細胞的分化,造骨細胞生理和激素,生長因子,和對造骨細胞的功能及分化有影響的細胞因子。
MAC-1細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸浮;細胞背景資料:皮膚T淋巴瘤;女性
JM1細胞系;細胞傳代方法:換液2-3次一周;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞生長特性:懸浮生長 ;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CAL62細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:未分化甲狀腺癌;女性
TMD8細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:懸??;細胞背景資料:彌漫大B淋巴瘤;男性
HPT-8|小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞
HELF細胞系;細胞傳代方法:1:2傳代;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁生長??;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
B6Tert-1細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:滋養(yǎng)層;HGNC-TRET永生;女性
A-704細胞系;細胞傳代方法:1:3—1:4傳代,每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
CNLMG-B5537SKIN細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:成纖維細胞
SW480[SW-480]細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
NGEC細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁;細胞背景資料:胃黏膜;上皮細胞
HL7702細胞系;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
Calu-1細胞系;細胞傳代方法:消化10分鐘。1:2。3-4天長滿;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞生長特性:貼壁生長;細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
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關鍵字: HPT-8|小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞
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