重組牛腸激酶(r-EK, Enterokinase)
來源:大腸桿菌
產(chǎn)品形式:液體
體系:50 mM Tris-HCl、50%甘油、pH8.0
比活性:≥40 KIU/mg
濃度:1U/ul
分子量:26.2 kDa
等電點(diǎn):5.20
純度:≥95%(SDS-PAGE 檢測)
活性單位定義:于25℃,反應(yīng)緩沖液為50 mM Tris-HCl(pH8.0),16小時(shí)切割50ug(1mg/ml)融合蛋白達(dá)95%以上所需要的酶量,定義為個(gè)活性單位U。
(注:或在37℃,16小時(shí)內(nèi)將500ug的Thioredoxin-NP-27 95%降解為NP-27所需要的酶量,定義為個(gè)活性單位U)
規(guī)格:200U、1000U
保存:-20℃
有效期:3 年
相關(guān)介紹:腸激酶是一種絲氨酸蛋白水解酶,能高效專一地識(shí)別蛋白質(zhì)中Asp-Asp-Asp-Asp-L(DDDDK)序列,并在賴氨酸(Lys,K)的C 端水解肽鍵,產(chǎn)生切割。腸激酶具有的高度專一性和高效酶切特性使其被廣泛應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā)。天然腸激酶由1 條115 kDa 的重鏈和1 條35 kDa 的輕鏈組成,重鏈起錨定細(xì)胞膜的作用,輕鏈具有全酶完整的催化活性。本產(chǎn)品采用大腸桿菌分泌表達(dá)牛腸激酶的輕鏈活性核心區(qū)域(235A.A., 26.2 kDa),比活性更高,特別適用于基因工程融合蛋白的酶切,且專為切割重組表達(dá)融合蛋白需要而設(shè)計(jì),含有His-6重組標(biāo)簽,適合于Ni-親和層析柱的不同分離純化方式。
注意事項(xiàng):(1)腸激酶的活性影響成分:如>2 M Urea,>250 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1% SDS,>50mM Imidazole。樣品中如果含有這些成分,需要透析至50 mM Tris-HCl(pH8.0)。
(2)磷酸鹽會(huì)抑制腸激酶的活性,應(yīng)避免使用磷酸鹽緩沖液作為酶切體系。
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