"RTE細(xì)胞：大鼠氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

RTE Cell

細(xì)胞形態(tài)特性：多角

13754-86-4

有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類(lèi)型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI 1640培養(yǎng)基是專(zhuān)為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。

RTE細(xì)胞：大鼠氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

THC8307細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

H4-II E細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HOP-92細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

OVCAR5細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：卵巢癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性

SW480[SW-480]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：1)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書(shū)，包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類(lèi)型等；2)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同，有的生長(zhǎng)很快，比如說(shuō)MDA-MB-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT474就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿(mǎn)，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了；3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過(guò)久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況；4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。1)不管買(mǎi)的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話(huà)，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下；3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；5)注意個(gè)人衛(wèi)生。

NCI-H2085細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3-1：6傳代 ；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HSC(Human Schwann)細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：雪旺細(xì)胞

Huh-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

T/GHA-VSMC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

769-P細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：4—1：12傳代，2—3天換液一次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞系1975年建系，源自一位63歲白人女性的初期透明細(xì)胞腺癌組織，細(xì)胞呈圓形且邊界不清，核漿比大，有微絨毛及橋粒。該細(xì)胞可在軟瓊脂上生長(zhǎng)。 

M453細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)；細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分；細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

RTE細(xì)胞：大鼠氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前1d換液；2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×10／ml左右密度，離心，去上清；3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；4)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加1.5m懸液；5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；6)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，30～60s內(nèi)完成；3)凍存管用70％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加10ml培養(yǎng)液；4)低速離心(500～1000r／min) 5min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到10／ml，在融后稀釋20倍時(shí)，仍能保持5×10／ml數(shù)量。

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

RTE細(xì)胞：大鼠氣管上皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：1：3傳代，3-4天換液一次

傳代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；2)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細(xì)胞懸液接種1)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至10(7)～10(8)/ml；5)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位，＞10(6)細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下：1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；2)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種1×10(6)腹水瘤細(xì)胞；3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7-12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml；4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>