解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：1)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升；2)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為1-5天，但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；3)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

NCI-H1944[H1944]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SK-BR-3[SKBR3]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

SNK1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸??；細(xì)胞背景資料：NK/T細(xì)胞淋巴瘤；女性

SNU-475細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

QGY7703細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肝癌；女性

U-251 MG細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：3傳代；3-4天1次?！?；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁生長??；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HOCF細(xì)胞：人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

公司主營ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)來源細(xì)胞系及原代細(xì)胞，全程提供細(xì)胞系背景、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件、傳代方法等復(fù)蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細(xì)胞系培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，能提供細(xì)胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾！公司由在國外工作和學(xué)習(xí)多年的留學(xué)人員創(chuàng)辦，由國內(nèi)中國科學(xué)院上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所，復(fù)旦大學(xué)，同濟(jì)大學(xué)等多名工作在線的細(xì)胞培養(yǎng)專家，提供細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持。公司依靠自身一些的技術(shù)和理念，以世界一流的技術(shù)支撐陣容，提供一系列細(xì)胞相關(guān)的技術(shù)服務(wù)。為中國的生命科學(xué)事業(yè)趕超歐美，提供了重要的基石；公司將依靠自主研究開發(fā)的高技術(shù)高質(zhì)量和有絕對(duì)的價(jià)格競爭力的產(chǎn)品，立足國內(nèi)，面向世界。力爭打破國外大公司在細(xì)胞培養(yǎng)科學(xué)領(lǐng)域接近壟斷的地位，為中國在生命科學(xué)的這一領(lǐng)域一席之地。公司籌劃未來三年內(nèi)，在沈陽、濟(jì)南、北京、西安、寧夏、武漢、等國內(nèi)代表城市建立細(xì)胞培養(yǎng)分實(shí)驗(yàn)室，以便更好的服務(wù)國內(nèi)廣大醫(yī)院、大學(xué)、制藥企業(yè)等，你們的每一份關(guān)心和支持，都是我們前進(jìn)的動(dòng)力！

細(xì)胞背景資料：脈絡(luò)膜；成纖維細(xì)胞

HOCF細(xì)胞：人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

傳代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：1)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；2)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細(xì)胞懸液接種1)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)80～100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；4)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至10(7)～10(8)/ml；5)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位，＞10(6)細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；6)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下：1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；2)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種1×10(6)腹水瘤細(xì)胞；3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7-12d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml；4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/div>