"MT2細(xì)胞：人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MT2 Cell

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書

72784-42-0

常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。

MT2細(xì)胞：人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：懸浮

HCT-15細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

RAJI細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：維持細(xì)胞濃度在4×105/ml-3×106/ml；根據(jù)細(xì)胞濃度每2-3天補(bǔ)液1次；細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：Raji細(xì)胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是個(gè)人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細(xì)胞，為B細(xì)胞起源。該細(xì)胞中含有EBV，需要在二級(jí)生物安全柜中操作；可作轉(zhuǎn)染宿主。

CHO-S細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

S37細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：肉瘤細(xì)胞

Colon26細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：1)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；2)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT474就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；3)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長的慢，買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下；3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；5)注意個(gè)人衛(wèi)生。

NE-4C細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：神經(jīng)干細(xì)胞

HIC-2細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2傳代；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁生長?。患?xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

CRFK細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：腎；自發(fā)永生；女性

NCI-H217細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：4傳代，每周2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣；細(xì)胞生長特性：貼壁生長　；細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞1989年建系，源自一位患有肺鱗狀細(xì)胞癌的男性，該患者不吸煙。

NCI-H1436細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：隨細(xì)胞的密度而增加；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸浮生長；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

HLEC細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁；細(xì)胞背景資料：淋巴；內(nèi)皮細(xì)胞

MT2細(xì)胞：人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。

細(xì)胞背景資料：T淋巴細(xì)胞白血病

MT2細(xì)胞：人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

【凍存細(xì)胞操作】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染)，在凍存前1d換液；2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×10(7)/ml左右密度，離心，去上清；3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10％二甲基亞砜(DMSO) 或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；4)分裝于無菌凍存管中，每管加1.5m懸液；5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；6)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-1℃/min的速度，在30～40min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞操作】1)從罐中取出凍存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，30～60s內(nèi)完成；3)凍存管用70％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加10ml培養(yǎng)液；4)低速離心(500～1000r/min) 5min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到10(7)/ml，在融后稀釋20倍時(shí)，仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。

MC3T3-E1Subclone14細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Hela299細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

LS180細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

NCI-H1623[H1623]細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Ha Fe細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分；細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系；細(xì)胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書；細(xì)胞生長特性：懸??；細(xì)胞背景資料：急性T淋巴細(xì)胞白血?。荒行?/div>