"THLE-2細胞：人肝永生化細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

THLE-2 Cell

細胞形態(tài)特性：上皮樣

87-48-9

常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性，來使得細胞脫離基質附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。

THLE-2細胞：人肝永生化細胞

細胞生長特性：貼壁生長

CT26WT細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

PtK2(NBL-5)細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

LIXC-011細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

BEP2D細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：支氣管；上皮細胞；HPV18轉化

Pcc4細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于4℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T25培養(yǎng)瓶：是用T25細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T25培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用15ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T25培養(yǎng)瓶，可以暫時T75培養(yǎng)瓶，加入10-15ml培養(yǎng)基，建議10ml培養(yǎng)基，也可以使用T175培養(yǎng)瓶，加入50-60ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(1000rpm，3min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。

sf9細胞系；細胞傳代方法：1：5傳代；2-3天換液1次；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：混合生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

MLTC-1細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：睪丸間質瘤

MA104細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

CTLL-2[CTLL2]細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

RAG細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：腎癌；BALB/c

HCT116細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

THLE-2細胞：人肝永生化細胞

細胞產品包裝：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：1ml凍存管(兩支)

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預防可從以下幾方面著手：1)添加抗生素：各種抗生素性質不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應用比單用效果好，預防性應用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；2)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒30min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

THLE-2細胞：人肝永生化細胞

細胞傳代方法：1：3-1：6傳代；2-3天換液1次。

細胞培養(yǎng)相關培養(yǎng)基選購基本指南：如何選擇培養(yǎng)基：經常聽到有人問，這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫，那很簡單，問供應商就行了?；蛘哒业较嚓P的文獻，作為參考。培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對某一種細胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經祖細胞基礎培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應商推薦，然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產品：首先，當然需要找對品牌，其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對自己所養(yǎng)的細胞，咨詢供應商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產品。關于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產品，也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產品。培養(yǎng)基的選擇和使用；MEM：成分簡單，貼壁細胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉染后轉化細胞的篩選培養(yǎng)；RPM1640：應用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng)，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞；199、109培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好；F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng)；F12培養(yǎng)基：適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)；McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。

CEL細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：胚胎；肝細胞

HSC細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

A172細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內可長滿；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。在免疫抑制小鼠中不成瘤。

Balb/3T3細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內可長滿；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

NCI-H841細胞系；細胞傳代方法：1：3—1：5傳代，；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：混合型生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HEC-1B細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

LM-6細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

THLE-2細胞：人肝永生化細胞

RPMI-7951細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：4傳代，2天換液1次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

HPC-Y5細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：貼壁；細胞背景資料：胰腺管癌；淋巴結轉移

TE-15細胞系；細胞傳代方法：消化3-5分鐘。1：2。3天內可長滿；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

A498細胞系；細胞傳代方法：1：2傳代；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞生長特性：貼壁生長；細胞背景資料：該細胞系由AaronsonS建立，源自一位52歲患有腎癌的女性病人。

MC38細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞生長特性：懸浮+貼壁；細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

MOLM-14細胞系；細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞生長特性：懸??；細胞背景資料：急性髓系白血?。荒行?/div>