??????碧云天生產(chǎn)的SABC-HRP Kit with Anti-Mouse IgG (IHC & ICC)是基于Streptavidin-Biotin Complex (SABC)信號(hào)放大系統(tǒng)而研制的用于免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry, ICC)等基于生物素標(biāo)記的各種高靈敏度檢測(cè)。
??????本試劑盒檢測(cè)靈敏度高。與常規(guī)的檢測(cè)方法相比，由于本試劑盒采用了SABC信號(hào)放大系統(tǒng)，檢測(cè)靈敏度顯著提高，通常檢測(cè)靈敏度比常規(guī)方法可以提高約5-10倍。常規(guī)方法檢測(cè)信號(hào)過(guò)弱時(shí)，強(qiáng)烈推薦嘗試本試劑盒。
??????本試劑盒特異性強(qiáng)、背景低。本試劑盒采用了比Avidin特異性更強(qiáng)、背景更低、靈敏度更高的Streptavidin。Streptavidin (鏈霉親和素)是從Streptomyces adidinii?中純化獲得的一種分子量為66kD的四聚體蛋白，可以同時(shí)結(jié)合4個(gè)生物素分子，其對(duì)生物素的解離常數(shù)(Kd, dissociation constant)可達(dá)10-15M，比通?？乖贵w的親和力高約100萬(wàn)倍，可以確保與生物素高度專(zhuān)一地結(jié)合。Streptavidin與雞蛋清來(lái)源的Avidin (親和素)在空間結(jié)構(gòu)以及與生物素的親和力方面具有高度的相似性，但Streptavidin等電點(diǎn)幾乎為中性(pI=6.0-6.5)，其在中性條件下幾乎不帶電荷。而Avidin的pI=10.5，在中性條件下帶正電荷。因此Streptavidin比Avidin的非特異性結(jié)合更低，檢測(cè)靈敏度更高。
??????檢測(cè)原理：參考圖1，組織、細(xì)胞、轉(zhuǎn)移到膜上的或者結(jié)合于多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上的抗原先與一抗結(jié)合，后者再與生物素標(biāo)記的二抗結(jié)合；按照適當(dāng)比例將Streptavidin和生物素標(biāo)記的辣根過(guò)氧化物酶(Biotin-labeled Horseradish Peroxidase, Biotin-HRP)混合，形成網(wǎng)絡(luò)狀的SABC-HRP (Streptavidin-Biotin Complex containing HRP)復(fù)合物；接著二抗上標(biāo)記的生物素再與SABC-HRP結(jié)合，加入HRP底物進(jìn)行顯色或發(fā)光反應(yīng)即可檢測(cè)到相應(yīng)的信號(hào)。其中Streptavidin和Biotin-HRP混合后形成網(wǎng)絡(luò)狀復(fù)合物是信號(hào)能被放大的關(guān)鍵，相當(dāng)于一個(gè)待檢測(cè)的生物素分子通過(guò)SABC-HRP復(fù)合物的識(shí)別最終可以由很多個(gè)HRP分子來(lái)顯示其信號(hào)，從而達(dá)到了信號(hào)放大的效果。

圖1. 本試劑盒的檢測(cè)原理圖。

??????本試劑盒用于IHC和ICC時(shí)，可以配制成50ml的生物素高效標(biāo)記二抗工作液和50ml的SABC工作液。按照IHC和ICC每個(gè)樣品需要使用100μl的生物素高效標(biāo)記二抗工作液和100μl的SABC工作液計(jì)算，本試劑盒可用于500個(gè)樣品的檢測(cè)。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存，一年有效。4℃保存，一個(gè)月有效。
注意事項(xiàng)：
??????本試劑盒使用過(guò)程中所需的溶液，不能含有疊氮鈉等過(guò)氧化物酶(peroxidase)抑制劑，也不能加入可能含有生物素的溶液，如常規(guī)血清、脫脂奶粉、細(xì)胞培養(yǎng)液等，否則會(huì)降低本試劑盒的檢測(cè)靈敏度。
??????任何與液體孵育有關(guān)的步驟都需要確保液體能很好地覆蓋樣品。樣品沒(méi)有被液體充分覆蓋而最終出現(xiàn)發(fā)干的情況，會(huì)導(dǎo)致染色不能正常進(jìn)行。
??????實(shí)驗(yàn)所需緩沖液宜新鮮配制。長(zhǎng)期放置的緩沖液可能會(huì)因?yàn)槲⑸镂廴?，而?dǎo)致檢測(cè)效果的下降。
??????為提高檢測(cè)靈敏度，推薦使用雙蒸水或三蒸水。低電導(dǎo)率的去離子水也可能含有微量過(guò)氧化物酶的抑制劑從而影響檢測(cè)靈敏度。
??????本試劑盒中的Streptavidin和Biotin-HRP兩種試劑需配套使用，切勿與其它試劑混用。
??????本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。