培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：DMEM/F12+10%FBS 

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5% 

溫度：37℃

細胞描述

名稱：臍動脈平滑肌細胞（人源）

數(shù)目： 106/管

活力：＞90%

代數(shù)：p1-p3代

凍存：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO

運輸：干冰運輸（1管）或者活細胞T-25一瓶

用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療

細胞傳代方法

顯微鏡下觀察細胞，當覆蓋80%底面積時，進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細胞容易老化。

在生物安全柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中

用PBS或者生理鹽水洗一遍

加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘

然后取出細胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘

離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。

細胞復蘇方法

取出凍存管后，投入37℃水浴中，震蕩解凍2 min

酒精消毒管壁外側(cè)后，將其轉(zhuǎn)入超凈臺中，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，加入9 ml 37℃預熱的平滑肌細胞培養(yǎng)基重懸，將離心管離心（1000rpm，5 min）

棄去上清，再加入5ml 平滑肌細胞培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入T-25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。