培養(yǎng)條件
培養(yǎng)基:成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基
氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%
溫度:37℃
細(xì)胞描述
本公司培養(yǎng)出品的大鼠胚胎成纖維細(xì)胞取自SPF 級的16-18天的SD大鼠胚胎,用成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代。
名稱:大鼠胚胎成纖維細(xì)胞
規(guī)格:106/管
活力:>90%
代數(shù):p1-p3
運輸:干冰運輸(凍存管)/ 常溫運輸(T-25培養(yǎng)瓶)
用途:本產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人或動物體外治療與診斷
細(xì)胞傳代方法
顯微鏡下觀察細(xì)胞,當(dāng)覆蓋80%底面積時,進(jìn)行細(xì)胞傳代。注意不要等到細(xì)胞覆蓋100%的時候才傳代,那樣細(xì)胞容易老化。
在生物安全柜或者超凈臺中,將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中
用PBS或者生理鹽水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘
然后取出細(xì)胞,加入5ml培養(yǎng)基,吹打均勻后,轉(zhuǎn)移到15ml離心管中,1000rpm 離心5分鐘
離心后,去掉上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照1:3-1:5的比例進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞復(fù)蘇方法
取出凍存管后,投入37℃水浴中,震蕩解凍2 min,
酒精消毒管壁外側(cè)后,將其轉(zhuǎn)入超凈臺中,將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中,加入5 ml 37℃預(yù)熱的DMEM/F12+10%FBS培養(yǎng)基
將離心管離心(1000rpm,5 min)
棄去上清,再加入5ml 成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存方法
本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO 凍存液冷凍
關(guān)鍵字: 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞
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