??????谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒(Glutathione Reductase Assay Kit)是一種簡單易行的通過紫外比色來檢測(cè)細(xì)胞、組織或其它樣品中谷胱甘肽還原酶(Glutathione reductase,GR)活性的試劑盒。谷胱甘肽還原酶在許多組織中都有分布,可以維持細(xì)胞內(nèi)充足的還原型谷胱甘肽(GSH)水平。GSH可以清除自由基和一些有機(jī)過氧化物,或作為谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物來清除一些過氧化物。 ??????谷胱甘肽還原酶可以還原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成還原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反應(yīng)產(chǎn)生黃色的TNB和GSSG,并可以通過測(cè)定A412來檢測(cè)TNB的生成量。適當(dāng)設(shè)置應(yīng)體系,前后兩個(gè)反應(yīng)合并起來后,GSSG/GSH過量而GR相對(duì)不足時(shí),該反應(yīng)體系中谷胱甘肽還原酶就成為整個(gè)反應(yīng)體系的限速因素,此時(shí)黃色的TNB生成量和谷胱甘肽還原酶的活性呈線性正相關(guān)。從而通過測(cè)定A412就可以計(jì)算出谷胱甘肽還原酶的活性水平。本試劑盒的具體反應(yīng)原理如下:
??????兩個(gè)反應(yīng)相合并: ??????本試劑盒可以檢測(cè)組織勻漿液上清、細(xì)胞裂解液上清等生物樣品中的谷胱甘肽還原酶的活性。一個(gè)試劑盒共可以進(jìn)行100次檢測(cè)。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。NADPH溶解后宜-70℃保存,4℃可以保存一天,-20℃保存一周后NADPH會(huì)減少10%以上。GSSG和DTNB在配制成溶液后,適當(dāng)分裝,-20℃保存。 注意事項(xiàng): ??????本試劑盒檢測(cè)時(shí)牽涉到氧化還原反應(yīng),所有氧化劑或還原劑都會(huì)干擾本試劑盒的測(cè)定。另外,硫酸鈉、硫酸銨和鐵氰化物都會(huì)干擾本試劑盒的測(cè)定。請(qǐng)盡量避免。 ??????樣品可以立即測(cè)定,也可以-70℃凍存待以后測(cè)定。 ??????一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)的溫度,否則會(huì)引起較多誤差。 ??????NADPH不太穩(wěn)定,要嚴(yán)格按照后續(xù)說明操作,謹(jǐn)防失活。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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