??????免疫染色通透液(Saponin) (Immunostaining Permeabilization Buffer with Saponin, 也稱Immunostaining Permeabilization Solution with Saponin),可以用于免疫染色等多種原位檢測時細(xì)胞樣品、冰凍或石蠟切片的通透處理,有助于暴露抗原、核酸等作用靶點(diǎn),使抗體、探針或標(biāo)記物等更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),從而確保染色等的檢測效果。本產(chǎn)品為即用型工作液,可以直接使用,無需稀釋。 ??????本產(chǎn)品通透能力較強(qiáng),推薦用于各種常規(guī)的免疫熒光、免疫組化、免疫細(xì)胞化學(xué)、流式檢測等中細(xì)胞的通透,特別適合細(xì)胞膜蛋白的檢測。本產(chǎn)品不會溶解細(xì)胞膜,不會影響流式檢測時的光散射。但本產(chǎn)品不推薦用于檢測細(xì)胞核及線粒體內(nèi)的蛋白。對于通透效果要求不高的情況,也可以使用碧云天的免疫染色洗滌液(P0106, P0106C, P0106L)或免疫染色通透液(Triton X-100)(P0096)。對于通透要求比較高的情況,可以使用免疫染色強(qiáng)力通透液(P0097)。對于凝集素(lectin)的檢測推薦使用免疫染色通透液(Triton X-100) (P0096)或免疫染色強(qiáng)力通透液(P0097)。 ??????通透液通??梢酝ㄟ^使用有機(jī)溶劑例如甲醇、丙酮等,或者使用去垢劑例如Triton X-100、Saponin等來實(shí)現(xiàn)對于細(xì)胞膜的通透。甲醇或丙酮等有機(jī)溶劑,一方面可以溶解細(xì)胞膜和核膜從而充分暴露細(xì)胞漿和細(xì)胞核中的目的蛋白等,另一方面也可以使細(xì)胞內(nèi)的蛋白變性起到固定的作用。甲醇或丙酮等有機(jī)試劑操作比較簡單,一步處理可以同時實(shí)現(xiàn)固定和通透,缺點(diǎn)是膜蛋白也會被溶解掉并且有些蛋白變性后不利于后續(xù)的檢測,因此有機(jī)溶劑使用相對較少,僅用于一些要求比較粗糙的檢測。Triton X-100是常用的通透試劑,可以通透細(xì)胞膜和核膜,作用的原理也是非特異性地溶解細(xì)胞膜,因此其缺點(diǎn)是不利于膜蛋白的檢測,但當(dāng)使用多聚甲醛進(jìn)行交聯(lián)和固定后,相當(dāng)一部分膜蛋白會被交聯(lián)固定,從而不會被Triton X-100溶解,因此后續(xù)仍然能檢測到。Saponin可以特異性地溶解細(xì)胞膜中的膽固醇,從而實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞膜上選擇性地打孔,其優(yōu)點(diǎn)是適合于細(xì)胞膜蛋白的檢測,特別適合通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞膜上的標(biāo)志性蛋白,缺點(diǎn)是對于一些膽固醇含量低的細(xì)胞通透效果差,通透效果弱于Triton X-100和有機(jī)溶劑,并且不能通透膽固醇含量很低的核膜和線粒體膜。對于凝集素(lectin)的檢測,含Triton X-100等非特異性去垢劑的通透液的效果顯著優(yōu)于主要含Saponin的通透液。 ??????本免疫染色通透液(Saponin)中含有Saponin等去垢劑,配制在PBS中。經(jīng)本免疫染色通透液(Saponin)處理的樣品,對于細(xì)胞膜目的蛋白的免疫染色檢測結(jié)果表明,染色效果與常規(guī)的通透液相比基本一致或有顯著增強(qiáng)。 ??????按照每個樣品需要0.1或1毫升免疫染色通透液(Saponin)計算,一個100ml包裝的本產(chǎn)品可以通透1000個或100個樣品,一個500ml包裝的本產(chǎn)品可以通透5000個或500個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????4℃保存,一年有效。-20℃可以長期保存,室溫保存一個月內(nèi)有效。 注意事項: ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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