??????在研究細(xì)胞時(shí)經(jīng)常要研究細(xì)胞的不同組份,而研究得最多的兩個(gè)細(xì)胞組份就是細(xì)胞核和細(xì)胞漿。分離細(xì)胞核蛋白和細(xì)胞漿蛋白,不僅可以用于研究蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位,而且很多時(shí)候分離出來(lái)的核蛋白可以用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控方面的研究,例如EMSA(也稱gel shift),footprinting等。 ??????細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一種比較簡(jiǎn)單、方便的從培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織中抽提細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白的方法。約90分鐘就可以完成培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白的分離。抽提得到的蛋白可以用于Western,EMSA,footprinting,報(bào)告基因檢測(cè)以及酶活力測(cè)定等后續(xù)操作。 ??????本試劑盒是通過(guò)細(xì)胞漿蛋白抽提試劑A和B,在低滲透壓條件下,使細(xì)胞充分膨脹,然后破壞細(xì)胞膜,釋放出細(xì)胞漿蛋白,然后通過(guò)離心得到細(xì)胞核沉淀。最后通過(guò)高鹽的細(xì)胞核蛋白抽提試劑抽提得到細(xì)胞核蛋白。 ??????對(duì)于細(xì)胞樣品,如果每個(gè)樣品的數(shù)量不超過(guò)二百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,本試劑盒可以抽提100個(gè)樣品;對(duì)于組織樣品,如果每個(gè)樣品的重量不超過(guò)30毫克,本試劑盒可以抽提100個(gè)樣品,如果每個(gè)樣品約為30-60毫克,本試劑盒可以抽提75個(gè)樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????-20℃保存,一年有效。 注意事項(xiàng): ??????需自備PMSF。PMSF一定要在抽提試劑加入到樣品中前2-3分鐘內(nèi)加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(ST506)可以向碧云天訂購(gòu)。 ??????抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。 ??????本試劑盒對(duì)于組織樣品,僅適合于新鮮組織,對(duì)凍存過(guò)的組織抽提效果很差。 ??????使用本試劑盒抽提到的細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白均可直接用碧云天生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P0009/P0010/P0010S/ P0011/P0012/P0012S)測(cè)定蛋白濃度。但不適合用Bradford法測(cè)定蛋白濃度。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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