??????碧云天的總SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)(Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8)是一種基于WST-8的顯色反應(yīng),通過比色來檢測細(xì)胞、組織或其它樣品中SOD即超氧化物歧化酶活性的試劑盒。 ??????超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)能催化超氧化物陰離子發(fā)生歧化作用,生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2),是生物體內(nèi)一種重要的抗氧化酶。 ??????目前有多種SOD活性測定法,其中NBT(氮藍(lán)四唑)法由于使用方便而被廣泛使用。但NBT法產(chǎn)生的甲臜染料水溶性差,易和被還原的黃嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率達(dá)不到100%等,從而使檢測的靈敏度和精確度受到影響;細(xì)胞色素C法也是一種常用來檢測SOD活性的方法,但細(xì)胞色素C其氧化活性高,易受樣品中的還原劑干擾,另外該方法需要連續(xù)測定吸光度值,對于SOD的檢測靈敏度比較低,并且不太適合大批量樣本的檢測。 ??????目前測定SOD比較先進(jìn)的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加穩(wěn)定、靈敏度更高。本試劑盒采用了目前測定SOD方法中穩(wěn)定性更好、靈敏度更高的WST-8法,可以檢測出低達(dá)0.5U/ml的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理參考圖1,WST-8可以和黃嘌呤氧化酶(Xanthine?Oxidase,?XO)催化產(chǎn)生的超氧化物陰離子(O2.-)反應(yīng)產(chǎn)生水溶性的甲臜染料(formazan?dye),由于SOD能催化超氧化物陰離子發(fā)生歧化作用,所以該反應(yīng)步驟可以被SOD所抑制,因此SOD的活性與甲臜染料的生成量成負(fù)相關(guān),從而通過對WST-8產(chǎn)物的比色分析即可計(jì)算SOD的酶活力。?
保存條件: ??????-20℃保存,半年有效。S0101-3 WST-8需避光保存。 注意事項(xiàng): ??????待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。 ??????標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。 ??????抗氧化物會(huì)對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。 ? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?
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