V8蛋白酶
Cat.No.:66676-43-5
EC:3.4.21.19
全名: 序列分析純V8蛋白酶;金黃色葡萄球菌V8蛋白酶
別名: V8蛋白酶;谷氨酰胺內切酶;天冬酰胺內切酶
儲存條件:凍干粉,2-8℃
來源:基因工程生產,大腸桿菌表達。
1.產品簡介
V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族,能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識別并切割Glu羧基端肽鍵,在pH 7.8的磷酸鹽緩沖液中識別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵,且對Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性,最適pH為8.0-8.5。在進行蛋白質酶切測序、肽圖譜分析和肽質量指紋圖譜分析中使用時,可以單獨使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有二異丙基氟磷酸(DFP)、α2- 巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴氨酸氯甲基酮(TLCK)。
2.產品特性
單位定義:在25℃,pH7.8的條件下,每分鐘催化底物(Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide)生成1μmol對硝基苯胺(4-nitroaniline)所需要的酶量為一個酶活性單位。
3.儲存和運輸穩(wěn)定性
儲存穩(wěn)定性:重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃,24個月穩(wěn)定;
溶解后穩(wěn)定性:用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下(1mg/ml),6個月穩(wěn)定;用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃(1mg/ml,無菌),2個月穩(wěn)定;用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃(0.5mg/ml)12h,活性可維持85%以上;溶解后溶液可反復凍融10次無活性損失。
運輸穩(wěn)定性:藍冰保溫運輸,活性穩(wěn)定。
4.推薦使用方法
1)使用前注意
可按使用量分裝以限度避免污染或自切。
2)目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白,例如25-50mM NH4HCO3 pH7.8,若溶解度不好對目的蛋白變性,添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對V8蛋白酶的影響見表一。
3)酶切
V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100(W/W),25℃或37℃酶切2-18h。
表一:V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑,尿素25℃2h,SDS25℃12h的穩(wěn)定性
(注:V8蛋白酶0.5mg/ml,50mM Tris-HCl pH8.0)
5.產品優(yōu)勢
序列分析純蛋白酶:特異性高,穩(wěn)定性好。
無動物源性:重組生產,無外源性的病毒污染,生產過程不使用任何動物源原料。
質量穩(wěn)定:批量生產,可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產;產 品批次間無差異,質量穩(wěn)定。
純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉:易于儲存和運輸。
符合法規(guī)要求:生產設備和生產環(huán)境符合相關法規(guī)要求,生產過程完全遵循NSF ISO 9001:2008質量體系并符合GMP指導原則。
質量文件完整:按客戶需求,可提供相關法規(guī)支持文件。
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關鍵字: 序列分析純V8蛋白酶;金黃色葡萄球菌V8蛋白酶; V8蛋白酶;谷氨酰胺內切酶;天冬酰胺內切酶
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基因工程羧肽酶B,基因工程胰蛋白酶和基因工程脂肪酶A都是由基因工程方法生產,純度高,不含雜酶,無羧肽酶A、糜蛋白酶等其他蛋白酶活性;無動物源性,出口產品無需進行終產品的動物源性檢驗。制品中不含蛋白酶抑制劑,產品安全。
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