Hep G2細胞系專業(yè)培養(yǎng)|HB-8065    "【細胞貨號】 HB-8065
【細胞縮寫】 Hep G2細胞
【細胞名稱】 Hep G2(人肝癌細胞)
【背景資料】 該細胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體；該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。
【細胞來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
【代次】 P4
【規(guī)格】 復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
【細胞數(shù)】 1*10（6）
【生物安全級別】 1
【生物體】 人
【組織來源】 肝
【細胞形態(tài)】 上皮細胞樣
【細胞特性】 貼壁
【細胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【細胞檢測】 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【培養(yǎng)條件】 詳見細胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細胞說明書
【主要文獻】 請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章"    "

有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度。
BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞。
Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)。
RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
干粉培養(yǎng)基：以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調(diào)pH值，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多，以前是這樣，但現(xiàn)在大家都認同了。 
無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的，從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。"    "

細胞培養(yǎng)相關(guān)培養(yǎng)基選購基本指南：
如何選擇培養(yǎng)基：經(jīng)常聽到有人問，這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。為什么這樣說呢?如果這種細胞是購自一些細胞庫，那很簡單，問供應(yīng)商就行了。或者找到相關(guān)的文獻，作為參考。
培養(yǎng)基這么多種，要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養(yǎng)基是公開配方的，或者是專門針對某一種細胞的，如昆蟲基本培養(yǎng)基和神經(jīng)祖細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基， 但是大部分液體培養(yǎng)基都是專利配方的，也就是說其中的成分是保密的。那么你只能是檢索文獻、讓供應(yīng)商推薦，然后用自己的細胞做幾次傳代培養(yǎng)來選出最合適的培養(yǎng)基。畢竟實踐出真知。
怎么樣才可以買到好的培養(yǎng)基產(chǎn)品：首先，當然需要找對品牌，其次是找對自己所在區(qū)域的品牌代理商，針對自己所養(yǎng)的細胞，咨詢供應(yīng)商該選用哪種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，這樣就可以買到好的而且適合自己的培養(yǎng)基產(chǎn)品。
關(guān)于培養(yǎng)基品牌，目前公司所知道的高校實驗室有些同學在用Corning系列培養(yǎng)產(chǎn)品，也有同學在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的產(chǎn)品。
培養(yǎng)基的選擇和使用
MEM：成分簡單，貼壁細胞首選。
DMEM：分高糖型和低糖型。
IDMEM：適合細胞密度低，生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選，DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細胞的篩選培養(yǎng)。
RPM1640：應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng)首選，主要針對淋巴細胞，也適合其他細胞。
199、109培養(yǎng)基：成分齊全，培養(yǎng)效果較好。
F10培養(yǎng)基：適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng)。
F12培養(yǎng)基：適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)。
McCoy’s5A培養(yǎng)基：特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。"    "

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C0296 Ealy926人腸系膜下腔動脈血管內(nèi)皮細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
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C0307 ED-25人肝靜脈內(nèi)皮細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
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C0311 EMT-6小鼠乳腺癌四代細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0312 EOMA鼠血管瘤細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0315 ER-30人乳腺癌細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0317 ESC-410人食管癌細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0318 F-36P骨髓增生異常綜合征細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0319 F56人腺癌細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0322 F98大鼠膠質(zhì)瘤細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0325 FAT大鼠鼻咽癌細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0326 FBHE牛心內(nèi)皮細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0327 FBM胎兒骨髓間充質(zhì)細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0328 Fc615小鼠前胃癌瘤株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0329 FC33Asp2人胚胎腎四代細胞轉(zhuǎn)化細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0330 Fc615小鼠前胃癌瘤株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0331 FD4人淋巴四代細胞與倉鼠肺四代細胞雜交細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0332 FD6人淋巴四代細胞與倉鼠肺四代細胞雜交細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！
C0336 FL62891人肝癌細胞株 ，公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系（三千多種），提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息，我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗，能提供細胞培養(yǎng)全方位的技術(shù)支持，讓您實驗再無煩擾！"    "

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：
傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1：2或1：2以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。
實驗步驟：① 入無菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;
② 倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預熱。
③ 超凈臺臺面應(yīng)整潔，用75%酒精棉球擦拭清潔;
④ 打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧;
⑤ 點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。
⑥ 將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
⑦ 倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下。
⑧ 每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。
⑨ 加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
⑩ 對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
注意事項
① 傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材。
② 每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代。
③ 如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。
傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。
對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。"    "

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