僅供科研使用,不得用于臨床檢驗。
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
通用名稱:小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse IFN-γ ELISA Kit
【包裝規(guī)格】
48T/96T
【預期用途】
僅供科研使用,不得用于臨床檢驗。
需要但未提供的材料及耗材:
1、酶標儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個月。
2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3、開封后,按照建議的條件保存,校準品、包被微孔板和hrp標記抗體,有效期為14天,其他成分在標簽標明的有效期內是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動的酶標儀,如thermo mk3,或者國產(chǎn)酶標儀。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min,去除細胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復凍融。
2、血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下,避免反復凍融。
3、血漿:肝素,edta,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復凍融。
樣本保存和穩(wěn)定性:
樣本在2-8℃條件下,可以儲存72h,或者在- 20℃儲存6個月。樣本收集后,不是一次檢測完,請按一次用量分裝凍存,避免反復凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
【檢驗方法】
試劑準備
1、使用前,所有的組分都要至少復溫30min,確保充分復溫到室溫。
2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會有結晶產(chǎn)生,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋,即1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。
3、底物:底物液a和b,在使用前,按1:1體積充分混合,混合后15分鐘內使用。
操作程序:
1、所有試劑和組分都先恢復到室溫,標準品、質控品和樣品,建議做復孔。
2、按前面試劑準備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設置標準品孔、樣本孔和空白孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μl,樣本孔加待測樣本50μl,空白孔不加。
5、除空白孔外,標準品孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μl。
6、用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
8、如此重復4次(共洗板5次)。若使用自動洗板機,請按洗板機操作程序進行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測的精度。洗板結束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應板。
9、將底物a和b按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μl。用封板膜蓋住反應板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μl,在酶標儀上讀取各孔吸光度(od值)。
【檢驗結果的解釋】
檢測完成后,以標準品濃度做為縱坐標,對應的吸光度(od值)作為橫坐標,利用計算機軟件,采用四參數(shù)logistic曲線擬合(4-pl),創(chuàng)建標準曲線方程,通過樣本的吸光度(od值),利用方程計算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋,通過上述方法測的的濃度值,要乘以稀釋倍數(shù),才是樣品的最終濃度。
【檢驗方法的局限性】
1、僅供科研使用,不得用于臨床診斷。
2、在試劑盒標示的有效期內使用,過期產(chǎn)品不得使用。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5、如果樣本值高于最高標準品濃度值,請將樣本適當稀釋后,再重新測定。
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結果,檢測前,請排除該因素。
7、通過其他方法得到的檢測結果,與本試劑盒測定結果不具有直接的可比性。
技術提示:
1、混合蛋白溶液時,避免起泡。
2、加校準品與樣本時,每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭,公共組分應該懸臂加樣,避免交叉污染。
3、合適的溫育時間,和充分的洗滌步驟,是保證實驗結果準確性的必要條件。
4、底物溶液為無色液體,保存過程中變?yōu)樗{色,代表底物溶液已經(jīng)失效,不得使用。
5、終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致,加入終止液后,藍色底物產(chǎn)物,會瞬間變?yōu)辄S色。
6、實驗中,用剩的板條,應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
7、所有液體組分,使用前充分搖勻,嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。
廢物處理:
所有使用或未使用的試劑,所有污染性的一次性材料,應當遵循傳染性或潛在傳染性產(chǎn)品的處理程序,每個實驗室都有責任根據(jù)其實驗的類型和危險性級別,進行廢物和污物的處理,同時要嚴格依照有關規(guī)定對待所有的廢物和污物。
【基本信息】
企業(yè)名稱:上海將來實業(yè)股份有限公司
生產(chǎn)地址:上海市楊浦區(qū)五角場高新技術產(chǎn)業(yè)園區(qū)
固定電話:021-60496032 / 60484409
傳真號碼:021-55660885
網(wǎng) 址:www.jonln.com
qq號碼:2880522968
郵 箱:shjlsw@163.com
公司簡介:
江萊生物(中國老牌ELISA試劑盒供應商)
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關鍵字: 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
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