轉基因大豆 MON89788 質粒分子標準物質可用于轉基因大豆、食品和飼料等的定量檢測、安全評價、實驗室質量控制、方法評價與驗證、技術仲裁等。

?一、樣品制備?

本標準物質是將轉基因大豆 MON89788 轉化體特異性序列和內標準基因片段共同構建于pEASY-T3 載體，得到 pNIM-004 質粒分子，經提取，純化和質量檢測及均勻性初檢合格后稀釋至4.02×106copy/μL 進行分裝。

?二、溯源性及定值方法該標準物質采用測序法、數(shù)字 PCR 方法對轉基因大豆 MON89788 轉化體特異性基因片段和大豆內標準基因片斷的拷貝數(shù)比值進行定值測量。測序法測量結果作為標準物質測序比值標準值；數(shù)字 PCR 方法測量結果作為標準物質 PCR 比值標準值。本標準物質通過使用滿足計量學特性要求的制備方法、測量方法和計量器具，保證其量值溯源性。

?三、特性量值及不確定度

標準值不確定度評定考慮了定值方法、均勻性、穩(wěn)定性引入的不確定度分量。?

四、均勻性和穩(wěn)定性評估?

參照 JJF1343 國家計量技術規(guī)范（等效 ISO 指南 35），采用實時熒光定量 PCR 方法，對該標準物質進行均勻性檢驗研究，最小取樣量 5μL，結果表明均勻性良好。按照先密后疏的原則采用實時熒光定量 PCR 方法對該標準物質進行穩(wěn)定性考察研究，標準值無方向性變化并通過平均值一致性檢驗，表明穩(wěn)定性良好。?

本標準物質自定值日期起，有效期為 7 年，研制單位將繼續(xù)跟蹤監(jiān)測該標準物質的穩(wěn)定性，有效期內如發(fā)現(xiàn)量值變化，將及時通知用戶。?

五、包裝、儲存及使用?

1.包裝與儲存：本標準物質采用 2mL 立式擰口塑料離心管包裝，500μL/瓶。建議-70?C 低溫長期保存。

?2.使用注意事項：使用前應先從冰箱內取出，平衡至室溫后再打開瓶蓋使用。樣品開封后，應盡快恢復密封狀態(tài)。?

3.使用建議：使用本標準物質制作標準曲線時，按照表 1 進行梯度稀釋，然后再采用熒光定量PCR 進行檢測，引物和探針序列詳見表 2。

?表 1 轉基因大豆 MON89788 質粒分子標準物質梯度稀釋說明

表 2 ?外源基因和內標準基因的引物及探針序列

六、參考文獻

[1] Delobel C.,NoensW., Querci M., Mazzara M., Cordeil S., Event-specific Method?for the Quantificaiton?of?Soybean?Line?MON89788?Using?Real-time?PCR:?Validation?Report.?2008.?Joint?Research?Centre,?Institute?for

Health and Consumer Protection.