Human TL1A-DR3 inhibition Kit (TR-FRET)

產(chǎn)品描述（Product Details）

組分（Materials Provided）

背景（Background）

TNF樣細(xì)胞因子1A（TL1A）及其受體、死亡受體3（DR3）和誘餌受體3（DcR3）分別是TNF和TNF受體蛋白超家族的成員。APC衍生的TL1A與淋巴細(xì)胞DR3的結(jié)合為活化的淋巴細(xì)胞提供了共刺激信號(hào)。DR3信號(hào)不僅影響效應(yīng)淋巴細(xì)胞的增殖活性和細(xì)胞因子的產(chǎn)生，還嚴(yán)重影響調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的發(fā)育和抑制功能。然而，DcR3限制了TL1A/DR3復(fù)合物的功能：減弱T細(xì)胞活化并下調(diào)促炎細(xì)胞因子的分泌。與DR3和DcR3一起，TL1A構(gòu)成了一個(gè)細(xì)胞因子系統(tǒng)，積極干擾免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)。人TL1A-DR3結(jié)合試劑盒（TR-FRET）可以在0.5-1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)到TL1A與DR3在均質(zhì)系統(tǒng)中的結(jié)合。它靈敏度高、檢測(cè)時(shí)間短、使用方便。

應(yīng)用說(shuō)明（Application）

該試劑盒是為TL1A與DR3的結(jié)合而開發(fā)的。

該產(chǎn)品僅用于研發(fā)。

存儲(chǔ)（Storage）

1）未開封的試劑盒應(yīng)在收到后儲(chǔ)存在2℃-8℃。

2）在外包裝上找到有效期，不要使用超過有效期的試劑。

3）打開的試劑盒應(yīng)按照成分表存放。保質(zhì)期為開封之日起30天。

原理（Assay Principles）

人TL1A-DR3抑制試劑盒（TR-FRET）基于TR-FRETs技術(shù)（時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移）。使用生物素化的人TL1A和銪螯合物標(biāo)記的鏈霉抗生物素蛋白的混合物作為供體，FA標(biāo)記的人DR3蛋白作為受體。

您的實(shí)驗(yàn)將包括3個(gè)簡(jiǎn)單步驟：

1）將試劑盒中的樣品或人抗TL1A中和抗體與人TL1A蛋白銪螯合物（供體）混合，在室溫下孵育0.5小時(shí)。

2）加入FA標(biāo)記的人DR3蛋白（受體），在室溫下孵育至少0.5小時(shí)。

3）使用微孔板閱讀器的TR-FRET模塊讀取665nm和620nm處的熒光信號(hào)。根據(jù)公式比率=“信號(hào)665 nm”/“信號(hào)620 nm”×10^4計(jì)算比率。比率值與樣品中的抑制劑呈負(fù)相關(guān)。

當(dāng)樣品不含人TL1A與人DR3結(jié)合的抑制劑時(shí)，由于人TL1A和FA標(biāo)記的人DR3的結(jié)合，供體和受體非常接近。供體在特定光源激發(fā)下發(fā)出的620nm信號(hào)被受體接收，發(fā)出665nm信號(hào)。

當(dāng)樣品含有人TL1A與人DR3結(jié)合的抑制劑時(shí)，抑制劑會(huì)阻止供體和受體之間的結(jié)合，從而防止FRET的發(fā)生。

背景（Background）：TL1A-DR3

TL1A蛋白屬于腫瘤壞死因子（TNF）家族，是TNFRSF25和TNFRSF6B的受體。TL1A參與NF-κB和C-Jun通路的激活，可作為粘膜免疫的調(diào)節(jié)因子，參與炎癥性腸?。?/span>IBD）發(fā)病機(jī)制的免疫通路。