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本品產(chǎn)僅供科研
產(chǎn)品名稱：霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒Vibrio cholerae
產(chǎn)品規(guī)格：50次/盒
本產(chǎn)品是以染料法熒光定量PCR技術為基礎開發(fā)的PCR試劑盒，它具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2.引物等組分經(jīng)過優(yōu)化，靈敏度高。
3.提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4.特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計，不會跟其他的DNA/RNA發(fā)生交叉反應。
5.既可用于定性檢測，又可用于定量檢測。用于定量檢測時線性范圍至少為5個數(shù)量級。
6.本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的染料法熒光定量PCR反應。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒Vibrio cholerae操作方法一、制備標準曲線樣品（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，
千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，
只提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照。
1.標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
2.用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭，下同）。
3.在7號管中加入5 μL 陽性對照（其濃度為1×10E8拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
4.換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
5.換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。
6.重復上面的操作直到得到6個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
1.用自選方法純化樣品的DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
2.如果有N個樣品，則需要進行N+2個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置qPCR反應（20μL體系，在樣品制備室進行）
如果進行定量分析，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于標準曲線樣品。
如果做定性分析，則6個標準曲線樣品只選一個做（可以選4號，其余樣品不變）。以下只介紹定量分析的反應設置。
四、數(shù)據(jù)處理
1.通過溶解曲線分析的結(jié)果排除無效數(shù)據(jù)。有Ct值，但Tm值跟陽性對照Tm不一樣的樣品(包括對照和待測樣品)，歸為假陽性，數(shù)據(jù)無效，不予以分析。Tm跟陽性對照Tm一致的，為有效Ct。
2.如果兩種陰性對照的溶解曲線所得Tm值跟陽性對照的Tm值一樣，說明環(huán)境或試劑可能有過去的PCR擴增產(chǎn)物污染，則此次實驗無效，需要解決污染問題再進行實驗。
3.如果兩種陰性對照(樣品制備陰性對照和PCR陰性對照)是假陽性，可以繼續(xù)分析其它樣品有效數(shù)據(jù)。
4.對定量檢測，以陽性對照樣品的濃度的log值為橫軸，以有效Ct值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品的有效Ct值從標準曲線上推算出樣品DNA濃度的log值，再換算出待測樣品的DNA濃度。
5.對定性檢測，則有有效Ct值的為陽性，無有效Ct值的為陰性。
霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒Vibrio cholerae樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。陽性對照需單獨放置，不要污染其他試劑。
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
4、自備試劑：樣品DNA。
霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒Vibrio cholerae注意事項
1所有操作嚴格按照說明書進行
2試劑盒內(nèi)各種組分使用前應自然融化，混勻并短暫離心；
3 反應液應避光保存；
4反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
5使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
6 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染；
7 實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；
霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒Vibrio cholerae相關產(chǎn)品如下：
| California Encephalitis Virus加利福利亞腦炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1415300 | 50次 | 3490 |
| Ovine Astrovirus 2(OAstV)綿羊星狀病毒2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1415220 | 50次 | 3490 |
| Ovine Astrovirus 1(OAstV)綿羊星狀病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1415210 | 50次 | 3490 |
| Ovine Astrovirus (OAstV)綿羊星狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1415200 | 50次 | 3490 |
| Chikungunya Virus(CHIKV)基孔肯尼雅病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1415100 | 50次 | 3490 |
| Canine Parvo Virus(CPV)犬細小病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1415000 | 50次 | 2990 |
| Ovine Adenovirus綿羊腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414900 | 50次 | 2990 |
| Vibrio tapetis蛤弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414890 | 50次 | 2990 |
| Vibrio vulnificus創(chuàng)傷弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414880 | 50次 | 2990 |
| Vibrio parahemolyticus副溶血性弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414870 | 50次 | 2990 |
| Vibrio mimicus擬態(tài)弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414860 | 50次 | 2990 |
| Vibrio harveyi哈維氏弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414850 | 50次 | 2990 |
| Vibrio fluvialis河流弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414840 | 50次 | 2990 |
| Vibrio cholerae霍亂弧菌O139型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414832 | 50次 | 2990 |
| Vibrio cholerae霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414831 | 50次 | 2990 |
| Vibrio cholerae霍亂弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414830 | 50次 | 2990 |
| Vibrio campbellii坎氏弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414820 | 50次 | 2990 |
| Vibrio alginolyticus溶藻弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414810 | 50次 | 2990 |
| Vibrio spp.弧菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414800 | 50次 | 2990 |
| Uropathogenic Escherichia coli泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414700 | 50次 | 2990 |
| Edwardsiella tarda遲鈍愛德華菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414620 | 50次 | 2990 |
| Edwardsiella ictaluri鮰愛德華氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414610 | 50次 | 2990 |
| Edwardsiella spp.愛德華氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414600 | 50次 | 2990 |
| Ippy Virus(IPPYV)伊派病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1414500 | 50次 | 3490 |
| Borrelia vincenti奮森疏螺旋體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414470 | 50次 | 2990 |
| Borrelia recurrentis回歸熱疏螺旋體（回歸熱包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414460 | 50次 | 2990 |
| Borrelia garinii伽氏疏螺旋體（伽氏包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414450 | 50次 | 2990 |
| Borrelia duttonii達氏疏螺旋體（達氏包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414440 | 50次 | 2990 |
| Borrelia burgdorferi伯氏疏螺旋體（伯氏包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414430 | 50次 | 2990 |
| Borrelia anserina鵝疏螺旋體（鵝包柔氏螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414420 | 50次 | 2990 |
| Borrelia afzelii 阿氏疏螺旋體（阿氏包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414410 | 50次 | 2990 |
| Borrelia spp.疏螺旋體（包柔螺旋體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 1414400 | 50次 | 2990 |
| Yellow Fever Virus( vaccine strain,17D)黃熱病病毒疫苗株17D 染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1414310 | 50次 | 3490 |
| Yellow Fever Virus(YFV)黃熱病病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 1414300 | 50次 | 3490 |
關鍵字： 霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒;霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒;霍亂弧菌O1型染料法熒光定量PCR試劑盒;PCR檢測試劑盒;晶風PCR試劑盒;
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