產(chǎn)品名稱(chēng):沙雷菌PCR試劑盒
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本產(chǎn)品就是根據(jù)PCR原理專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)的試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品DNA模板。
2. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
3. 產(chǎn)品精心優(yōu)化且特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟除此之外的其它微生物DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
4. PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的PCR反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于定性實(shí)驗(yàn),不能用于定量。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研
包裝規(guī)格及成分(具體信息詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)):
序號(hào) | 組成 | 50T/盒 |
1 | CSFV RT-PCR反應(yīng)液 | 875 μL×1管 |
2 | CSFV 混合酶液 | 125 μL×1管 |
3 | CSFV 陽(yáng)性對(duì)照 | 40 μL×1管 |
4 | CSFV 陰性對(duì)照 | 40 μL×1管 |
5 | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
沙雷菌PCR試劑盒的制備
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。
2. 如果有N個(gè)樣品,則需要做N+2個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽(yáng)性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 差異支原體 PCR 陽(yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
電泳分析
1. 取 5-10uL 擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)瓊脂糖電泳,檢測(cè)擴(kuò)增效果,由于擴(kuò)增產(chǎn)物較短,建議用 1.5%-2.0%的瓊脂糖凝膠。
2. 陽(yáng)性樣品預(yù)期得到的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為 200bp 左右。如果兩個(gè)陰性對(duì)照(樣品制備陰性對(duì)照或 PCR 陰性對(duì)照)有此擴(kuò)增產(chǎn)物,說(shuō)明環(huán)境污染,則整個(gè)實(shí)驗(yàn)無(wú)效,不需要分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 如果所有樣品和 PCR 陽(yáng)性對(duì)照均無(wú)此擴(kuò)增產(chǎn)物,則說(shuō)明有系統(tǒng)性的問(wèn)題(試劑、設(shè)備、程序、操作等),需要重復(fù)并排查原因。
4. 如果沒(méi)有上述兩種情況,則實(shí)驗(yàn)有效,可以分析樣品的擴(kuò)增結(jié)果。N+2 個(gè)樣品中有擴(kuò)增產(chǎn)物的判定為陽(yáng)性,無(wú)則判定為陰性。
沙雷菌PCR試劑盒樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
4、自備試劑:樣品DNA。
沙雷菌PCR試劑盒注意事項(xiàng):
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
沙雷菌PCR試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:
Bovine Immunodeficiency Virus(BIV)牛免疫缺損病毒RT-PCR試劑盒 | 1321100 | 50次 |
Pneumocystis jirovecii 耶氏肺孢子蟲(chóng)PCR試劑盒 | 1321020 | 50次 |
Pneumocystis carinii卡氏肺孢子蟲(chóng)PCR試劑盒 | 1321010 | 50次 |
Pneumocystis spp.肺孢子蟲(chóng)PCR試劑盒 | 1321000 | 50次 |
Rhipicephalus spp.棕蜱PCR試劑盒 | 1320900 | 50次 |
Equine Herpesvirus 4 (EHV-4)馬皰疹病毒4型PCR試劑盒 | 1320840 | 50次 |
Equine Herpesvirus 3 (EHV-3)馬皰疹病毒3型PCR試劑盒 | 1320830 | 50次 |
Equine Coital Exanthema Virus(同馬皰疹病毒3型)馬交媾疹病病毒PCR試劑盒 | 1320831 | 50次 |
Equine Herpesvirus 2 (EHV-2)馬皰疹病毒2型PCR試劑盒 | 1320820 | 50次 |
Equine Herpesvirus 1 (EHV-1)馬皰疹病毒1型PCR試劑盒 | 1320810 | 50次 |
Equine Herpesvirus(EHV)馬皰疹病毒PCR試劑盒 | 1320800 | 50次 |
Equine Influenza Virus(EIV)馬流感病毒H3N8亞型RT-PCR試劑盒 | 1320700 | 50次 |
Serratia marcescens粘質(zhì)沙雷菌PCR試劑盒 | 1320620 | 50次 |
Serratia liquefaciens液化沙雷菌PCR試劑盒 | 1320610 | 50次 |
Serratia spp.沙雷菌PCR試劑盒 | 1320600 | 50次 |
Equine Infectious Anemia Virus(EIAV)馬傳染性貧血病毒RT-PCR試劑盒 | 1320500 | 50次 |
Measles Virus麻疹病毒RT-PCR試劑盒 | 1320400 | 50次 |
Rickettsia mooseri莫氏立克次體(現(xiàn)名傷寒立克次體)PCR試劑盒 | 1318510同18560 | 50次 |
Corynebacterium diphtheriae白喉棒桿菌PCR試劑盒 | 1315820 | 50次 |
Taura Syndrome Virus(TSV)桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒 | 1310700 | 50次 |
Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌PCR試劑盒 | 1320300 | 50次 |
Pseudomonas putida惡臭假單胞菌PCR試劑盒 | 1320240 | 50次 |
Pseudomonas fluorescens熒光假單胞菌PCR試劑盒 | 1320230 | 50次 |
Pseudomonas mallei鼻疽假單胞菌PCR試劑盒 | 1320220 | 50次 |
Pseudomonas aeruginosa綠膿假單胞菌PCR試劑盒 | 1320210 | 50次 |
Pseudomonas spp.假單胞菌屬PCR試劑盒 | 1320200 | 50次 |
Emmonsia parva伊蒙微小菌PCR試劑盒 | 1320100 | 50次 |
Cache Valley Virus(CVV)卡奇谷病毒RT-PCR試劑盒 | 1320000 | 50次 |
Rotavirus E輪狀病毒E群RT-PCR試劑盒 | 1319950 | 50次 |
Rotavirus D輪狀病毒D群RT-PCR試劑盒 | 1319940 | 50次 |
Rotavirus C輪狀病毒C群RT-PCR試劑盒 | 1319930 | 50次 |
Rotavirus B輪狀病毒B群RT-PCR試劑盒 | 1319920 | 50次 |
Rotavirus A輪狀病毒A群RT-PCR試劑盒 | 1319910 | 50次 |
Rotavirus 輪狀病毒RT-PCR試劑盒(停) | 1319900 | 50次 |
Macrobrachium Rosenbergii Nodavirus(MrNV)羅氏沼蝦諾達(dá)病毒RT-PCR試劑盒 | 1319800 | 50次 |
Parainfluenza Virus 5(PIV-5)副流感病毒5型RT-PCR試劑盒 | 1319760 | 50次 |
Parainfluenza Virus 4b (PIV-4b)副流感病毒4b型RT-PCR試劑盒 | 1319750 | 50次 |
Parainfluenza Virus 4a (PIV-4a)副流感病毒4a型RT-PCR試劑盒 | 1319740 | 50次 |
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