細(xì)胞名稱：小鼠心肌細(xì)胞HL1/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次：P4
細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）
細(xì)胞凍存：無(wú)血清凍存液
細(xì)胞傳代：第一次建議1:2
小鼠心肌細(xì)胞HL1/LUC(帶熒光素酶)細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
1、收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，最后放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞完全貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
小鼠心肌細(xì)胞HL1/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
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| GT1771LUC | MS1/LUC | 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞MS1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1773LUC | BV2/LUC | 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%HEPES+1%P/S貼壁 |
| GT1774LUC | STC1/LUC | 小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞STC1/LUC(帶熒光素酶) | 5000 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1776LUC | MPC5/LUC | 小鼠腎足細(xì)胞MPC5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1778LUC | SV40MES13/LUC | 小鼠腎小球系膜細(xì)胞SV40MES13/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1779LUC | Renca/LUC | 小鼠腎癌細(xì)胞Renca/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1780LUC | C172/LUC | 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞C17.2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1784LUC | EMT6/LUC | 小鼠乳腺癌細(xì)胞EMT6/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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| GT1786LUC | MFC/LUC | 小鼠前胃癌細(xì)胞MFC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1787LUC | RM1/LUC | 小鼠前列腺癌細(xì)胞RM1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1788LUC | ASMC/LUC | 小鼠氣道平滑肌細(xì)胞ASMC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
| GT1789LUC | Lwnt3a/LUC | 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞Lwnt3a/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S+G4180.4mg/ml |
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| GT1791LUC | ATDC5/LUC | 小鼠胚胎瘤細(xì)胞-軟骨細(xì)胞ATDC5/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT1792LUC | E14/LUC | 小鼠胚胎干細(xì)胞E14/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+15%FBS+0.1uL/mLLIF+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%PS+1uL/mLβ－巰基乙醇+1%P/S培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被細(xì)胞呈集落生長(zhǎng) |
| GT1793LUC | 3T3L1/LUC | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3L1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
| GT1794LUC | BALB3T3cloneA31/LUC | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞BALB3T3cloneA31/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S80%密度時(shí)1:2傳代，生長(zhǎng)慢，傳代密度要大 |
| GT1795LUC | C3H10T12,Clone8/LUC | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞C3H10T12,Clone8/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1796LUC | MEF/LUC | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1797LUC | MEF人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1819/LUC(帶熒光素酶)(絲裂霉素C處理)/LUC | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEF(絲裂霉素C處理)/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S |
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