細(xì)胞名稱:人腎腺癌細(xì)胞A704/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無(wú)血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
人腎腺癌細(xì)胞A704/LUC(帶熒光素酶)細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
1、收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml完全培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞完全貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人腎腺癌細(xì)胞A704/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
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GT1603LUC | WILL2/LUC | 人B細(xì)胞淋巴瘤WILL2/LUC(帶熒光素酶) | 4000 | 1640+20%FBS+1%P/S懸浮 |
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GT1607LUC | RKOAS451/LUC | 人結(jié)腸癌細(xì)胞RKOAS451/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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GT1610LUC | JJN3/LUC | 人白血病細(xì)胞JJN3/LUC(帶熒光素酶) | 4000 | DF12+10%FBS+1%P/S懸浮 |
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GT1612LUC | CL40/LUC | 人結(jié)腸癌細(xì)胞CL40/LUC(帶熒光素酶) | 4000 | DF12+20%FBS+1%P/S貼壁 |
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GT1614LUC | MNNGHOSCl/LUC | 人骨肉瘤細(xì)胞MNNGHOSCl/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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GT1616LUC | HSC2/LUC | 人口腔鱗狀腫瘤細(xì)胞HSC2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1617LUC | KMS11/LUC | 人骨髓瘤細(xì)胞KMS11/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮+貼壁 |
GT1618LUC | WILL1/LUC | 人B細(xì)胞淋巴瘤WILL1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1619LUC | HARAB/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞HARAB/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1620LUC | SKCO1/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞SKCO1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1621LUC | HDQP1/LUC | 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞HDQP1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS |
GT1622LUC | COLO824/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞COLO824/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+15%FBS |
GT1623LUC | HCC1428/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞HCC1428/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS |
GT1624LUC | CAL148/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞CAL148/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+100ng/mlEGF |
GT1625LUC | RCK8/LUC | 人B細(xì)胞淋巴瘤RCK8/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1626LUC | NCIBL2009/LUC | 人淋巴母細(xì)胞瘤(EBV轉(zhuǎn)化)NCIBL2009/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1627LUC | LCLC97TM1/LUC | 人大細(xì)胞肺癌LCLC97TM1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+20%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1628LUC | EBC1/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞EBC1/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1629LUC | NCIH1373/LUC | 人肺腺癌細(xì)胞stage3ANCIH1373/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1630LUC | CAL51/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)CAL51/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1631LUC | MFE280/LUC | 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞MFE280/LUC(帶熒光素酶) | 4500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1632LUC | Kasumi6/LUC | 人急性粒細(xì)胞白血?。ǔ扇耍㎏asumi6/LUC(帶熒光素酶) | 5500 | DMEM+10%FBS+10ng/mIGM-CSF+1%P/S懸浮 |
GT1633LUC | SCC4/LUC | 人舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞SCC4/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+400ng/ml氫化可的松+1%P/S貼壁 |
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關(guān)鍵字: 人腎腺癌細(xì)胞A704/LUC(帶熒光素酶;細(xì)胞A704/LUC(帶熒光素酶;人腎腺癌細(xì)胞A704/LUC;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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