細(xì)胞名稱:人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶熒光素酶)
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運(yùn)輸費(fèi))
細(xì)胞凍存:無血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶熒光素酶),培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶熒光素酶),售后服務(wù)
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
更多相關(guān)產(chǎn)品如下:人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶熒光素酶)
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GT1150LUC | Ishikawa/LUC | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+15%FBS+1%NEAA+1%P/S貼壁 |
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GT1156LUC | Jurkat/LUC | 人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉懸浮 |
GT1157LUC | K562/LUC | 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系K562/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+10%FBS+1%P/S |
GT1158LUC | K562ADR/LUC | 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系阿霉素細(xì)胞耐藥株K562ADR/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S+1ug/mlADR半貼壁 |
GT1159LUC | kasumi1/LUC | 人紅白血病細(xì)胞kasumi1/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+20%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
GT1160LUC | KB/LUC | 人口腔表皮癌細(xì)胞KB/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
GT1161LUC | KG1A/LUC | 人急性髓性白血病細(xì)胞KG1A/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | IMDM+20%FBS+1%P/S |
GT1162LUC | KGN/LUC | 人卵巢顆粒細(xì)胞瘤細(xì)胞KGN/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S |
GT1163LUC | KLE/LUC | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞KLE/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | D/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1164LUC | KNS89/LUC | 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1165LUC | KU812/LUC | 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞KU812/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1166LUC | kyse150/LUC | 人食管鱗狀細(xì)胞癌kyse150/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640/F12(1:1)+2%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1167LUC | kyse30/LUC | 人食道癌細(xì)胞kyse30/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 48%1640+48%F-12+2%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
GT1168LUC | kyse410/LUC | 人食道鱗狀細(xì)胞癌kyse410/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+5-10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
GT1169LUC | LCC/LUC | 人喉癌細(xì)胞LCC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+15%FBS+1%P/S |
GT1170LUC | Li7/LUC | 人肝癌細(xì)胞Li7/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉 |
GT1171LUC | LLN/LUC | 人喉癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞LLNLLN/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+15%FBS+1%P/S |
GT1172LUC | LN229/LUC | 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞LN229/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+5%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1173LUC | LNCaPcloneFGC/LUC | 人前列腺癌細(xì)胞LNCaPcloneFGC/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
GT1174LUC | LOVO/LUC | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞LOVO/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | F12K+10%FBS+1%P/S |
GT1175LUC | LOVO5/Fu/LUC | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株LOVO5/Fu/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | F12K+10%FBS+1%P/S |
GT1176LUC | LS174T/LUC | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞LS174T/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1177LUC | Ls180/LUC | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞Ls180/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+1%P/S該細(xì)胞不能使用胰酶消化 |
GT1178LUC | Ls513/LUC | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞Ls513/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1179LUC | LX2/LUC | 人肝星狀細(xì)胞系LX2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1180LUC | Mahlavu/LUC | 人肝癌細(xì)胞Mahlavu/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁生長 |
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GT1182LUC | MCF7/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(非三陰)Her2陰性,ER陽性。MCF7/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島素+1%P/S貼壁 |
GT1183LUC | MDAKB2/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAKB2/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1184LUC | MDAMB157/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAMB157/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1185LUC | MDAMB231/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAMB231/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1186LUC | MDAMB361/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(非三陰)MDAMB361/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+20%FBS+1%P/S松散貼壁 |
GT1187LUC | MDAMB415/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(非三陰)MDAMB415/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S |
GT1188LUC | MDAMB435S/LUC | 人黑素瘤細(xì)胞MDAMB435S/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+0.01mg/ml胰島素+0.01mg/ml谷胱甘肽+1%P/S貼壁 |
GT1189LUC | MDAMB436/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAMB436/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+0.01mg/ml胰島素+16ug/ml谷胱甘肽 |
GT1190LUC | MDAMB453/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAMB453/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1191LUC | MDAMB468/LUC | 人乳腺癌細(xì)胞(三陰性)MDAMB468/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | L15+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1192LUC | ME180/LUC | 人子宮頸表皮癌細(xì)胞ME180/LUC(帶熒光素酶) | 3500 | MACOY'S5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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關(guān)鍵字: 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞KNS89/LUC(帶;細(xì)胞KNS89/LUC;人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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