H82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培，同時購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
H82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
H82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞，款后條款：
1）細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
1. 細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶咨詢訂購：H82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服：
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| GT2250C | RTgillW1 | 魚鰓細(xì)胞系RTgill-W1(ATCC CRL-2523) | 5000 | L-15+10%FBS無二氧化碳18-20攝氏度 |
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| GT2252C | WBF344 | 大鼠肝上皮樣干細(xì)胞WB-F344 | 1500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2253C | RTE | 大鼠氣管上皮細(xì)胞RTE | 2000 | MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)20%FBS |
| GT2254C | PC12(未分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12(未分化) | 1500 | F12K+15%horseserum+5%FBS |
| GT2255C | PC12(高分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12(高分化) | 900 | DMEM+10%FBS |
| GT2256C | PC12(低分化) | 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12(低分化) | 900 | 1640+10%馬血清+5%胎牛血清 |
| GT2257C | RS1 | 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞RS1 | 2000 | RPMI1640(w/oHepes)15%FBS |
| GT2258C | WalkerLLCWRC256 | 大鼠腹水癌細(xì)胞Walker/LLC-WRC256 | 3500 | 1640+10%FBS |
| GT2259C | ERH35 | RH-35大鼠肝癌細(xì)胞 | 1500 | DMEM+10%FBS |
| GT2260C | IAR20 | 大鼠肝細(xì)胞IAR20 | 1800 | MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)20%FBS |
| GT2261C | XC | 大鼠Wistar肉瘤細(xì)胞XC | 3500 | EMEM+10%FBS |
| GT2262C | 3LL | 小鼠肺癌細(xì)胞系3LL | 1800 | 1640+10%FBS |
| GT2263C | NS1 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞NS-1 | 1800 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2264C | SP2MIL6 | 小鼠骨髓瘤B淋巴細(xì)胞SP2/MIL-6 | 1800 | Hybri-CareMedium（ATCC+0.05mM2-Mercaptoethanol+10%FBS |
| GT2265C | GT11GT11 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT1.1/GT1-1 | 1800 | DMEM/F12+8%胎牛血清+2%馬血清（兩種血清均需滅活，滅活方法：42度，30分鐘） |
| GT2266C | B16F1 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F1 | 1000 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2267C | C3H10T12 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞C3H/10T1/2 | 1600 | MEM+10%FBS |
| GT2268C | Balb3T3 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞Balb/3T3 | 1500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2269C | Lcell | 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞L-cell | 1500 | DMEM（高糖）+10%FBS |
| GT2270C | DCS | 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞DCS | 1800 | 1640+10%FBS |
| GT2271C | PANC02 | 小鼠胰腺癌細(xì)胞PANC02 | 2500 | DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterG/LUCose)5%FBS |
| GT2272C | SW10 | SW-10小鼠神經(jīng)元細(xì)胞 | 3000 | DMEM+10%FBS |
| GT2273C | AT3 | AT-3小鼠乳腺癌細(xì)胞 | 3500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2274C | OKT3 | 小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗CD3)OKT3 | 1500 | IMDM+20%FBS |
| GT2275C | MOVAS | 小鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS | 3500 | DMEM+10%FBS+0.2mg/mlG418 |
| GT2276C | EpH4Ev | 小鼠乳腺上皮細(xì)胞EpH4-Ev | 3500 | DMEM+10FBS+1.2mcg/mLPuromycin |
| GT2277C | M1 | 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1 | 1500 | DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS |
| GT2278C | mIMCD3 | mIMCD-3小鼠腎髓質(zhì)細(xì)胞 | 5000 | DMEM/F12(1:1):Ham＇sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS |
| GT2279C | GC2spg | 小鼠精母細(xì)胞GC-2spg | 1800 | DMEM+10%FBS |
| GT2280C | M5076 | 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤M5076 | 1800 | RPMI1640(w/oHepes)15%HS |
| GT2281C | B16F0 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16-F0 | 1400 | 1640+10%FBS |
| GT2282C | 293 | 人胚腎細(xì)胞293 | 1500 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2283C | 293A | 人胚腎細(xì)胞293A | 1700 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2284C | F9 | F9小鼠胚胎癌細(xì)胞 | 1300 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2285C | H9c221 | 大鼠心肌細(xì)胞H9c22-1 | 1700 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2286C | MXY9K | MXY9K[NBL-2]犬腎細(xì)胞 | 1800 | MEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2287C | P3X63Ag8 | P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細(xì)胞 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
| GT2288C | HPNE | 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞HPNE | 1800 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
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關(guān)鍵字： H82狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;H82細(xì)胞;狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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