HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時(shí)購(gòu)買(mǎi)完培，同時(shí)購(gòu)買(mǎi)非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE，款后條款：
1）細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)：HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細(xì)胞HBE
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服：
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| GT2186C | T2 | 人淋巴母細(xì)胞T2(174×CEM.T2) | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
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| GT2189C | EC9706 | 人食管癌細(xì)胞EC9706 | 1800 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2190C | MKN74 | 人胃癌細(xì)胞MKN-74 | 1800 | RPMI1640+10%FBS |
| GT2191C | D407 | D407人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
| GT2192C | ARO | 人甲狀腺癌細(xì)胞ARO | 1800 | 1640+10%FBS |
| GT2193C | 293E | 穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞293E | 1800 | IMDM:Iscove＇sModiefiedDulbecco＇sMedium10%FBS |
| GT2194C | TE2 | TE-2人食管癌細(xì)胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
| GT2195C | TE3 | TE-3人食管癌細(xì)胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
| GT2196C | TE7 | TE-7人食管癌細(xì)胞 | 1800 | DMEM+10%FBS |
| GT2197C | 293FT | 表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞293FT | 1700 | DMEM(HG)+500ug/mlG418+10%FBS |
| GT2198C | 143B | 人骨肉瘤細(xì)胞143B | 1700 | MEMwith0.015mg/ml5-bromo-2'-deoxyuridine,90%+10%FBS |
| GT2199C | 8305C | 人甲狀腺未分化癌8305C | 1700 | EMEM+2mMGlutamine+1%NEAA+10%FBS. |
| GT2200C | 293c18 | 人胚腎細(xì)胞293c18 | 1700 | DMEM-H+10%FBS |
| GT2201C | GP293 | 人胚腎細(xì)胞GP293 | 1700 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2202C | 58F | 鼻咽癌細(xì)胞株5-8F | 1700 | 1640+10%FBS |
| GT2203C | PC3M | PC-3M人前列腺癌細(xì)胞 | 1700 | 1640+10%FBS |
| GT2204C | TE354T | TE354.T人皮膚基底細(xì)胞癌 | 1700 | DMEM+10%FBS |
| GT2205C | 610b | 鼻咽癌細(xì)胞株6-10b | 1700 | 1640+10%FBS |
| GT2206C | TU686 | 人喉癌細(xì)胞TU686 | 1700 | DMEM+10%FBS |
| GT2207C | NHE1 | NHE-1人鼻咽癌細(xì)胞 | 1700 | RPMI1640+10%FBS |
| GT2208C | HPAFII | 人胰腺癌細(xì)胞HPAF-II | 1600 | MEM+10%FBS |
| GT2209C | T84 | 人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞T84 | 1600 | A1:1mixtureofHam'sF12mediumandDulbecco'smodifiedEagle'smediumwith2.5mML-glutamine,95%fetalbovineserum,5%
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| GT2210C | BEL7404 | 人肝癌細(xì)胞BEL-7404 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT2211C | SPCA1 | 人肺腺癌細(xì)胞SPC-A-1 | 1500 | DMEM(高糖）+10%FBS |
| GT2212C | EJ | 人膀胱癌細(xì)胞EJ | 1500 | MEM培養(yǎng)基(GIBCO,添加NaHCO31.5g/L，SodiumPyruvate0.11g/L)，90%優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。氣相：空氣，95%二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
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| GT2213C | U373 | 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U373U251交叉污染 | 1500 | RPMI1640+10%FBS |
| GT2214C | 769P | 人腎癌細(xì)胞769-P | 1500 | RPMI-1640+10%FBS |
| GT2215C | KG1 | 急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞KG-1 | 1500 | IMDM+20%FBS |
| GT2216C | KATOIII | 人胃癌細(xì)胞KATOIII | 1500 | IMDM+20%FBS |
| GT2217C | 11B4PANC1 | 人胰腺癌細(xì)胞1.1B4/PANC-1 | 1500 | DMEM-H+10%FBS |
關(guān)鍵字： HBE135-E6E7人支氣管上皮樣細(xì)胞;人支氣管上皮樣細(xì)胞;HBE135-E6E7;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個(gè)蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊(duì)，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù)，深得新老客戶厚愛(ài)。本著“服務(wù)、誠(chéng)信、進(jìn)取”的精神，堅(jiān)持溝通你我，創(chuàng)新服務(wù)，為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。