大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時(shí)購(gòu)買完培,同時(shí)購(gòu)買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3,培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過(guò)80%匯合度時(shí),將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無(wú)血清凍存液(貨號(hào):C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):有些細(xì)胞貼壁不牢,在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)(后期對(duì)比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個(gè)T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3,售后條款:
1)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,核實(shí)后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實(shí)后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu):大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服:
GT1891C | YUMM17 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞YUMM1.7 | 3000 | DMEM/F12+10%胎牛血清+1%NEAA+1%P/S |
GT1892C | MC38OVA | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-OVA雞基因修飾MC38OVA | 6500 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%HEPES+1%P/S |
GT1893C | 15P1 | 小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P1 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1894C | AtT20 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT20 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1895C | cmt93 | 小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞cmt93 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1896C | L6565 | 小鼠白血病細(xì)胞L6565 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1897C | CFSC8B | 大鼠永生型肝星狀細(xì)胞CFSC8B | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1898C | AR42J | 大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J | 1500 | F12K+20%FBS+1%P/S |
GT1899C | INS1 | 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS1 | 1500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ-巰基乙醇+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
GT1900C | RSC96 | 大鼠雪旺細(xì)胞RSC96 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1901C | A7r5 | 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞A7r5 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
GT1902C | H9c2 | 大鼠心肌細(xì)胞H9c2 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S |
GT1903C | IEC6 | 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞IEC6 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S+0.01mg/ml胰島素貼壁 |
GT1904C | RBL2H3 | 大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞RBL2H3 | 1500 | MEM+15%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1905C | HBZY1 | 大鼠腎小球系膜細(xì)胞HBZY1武漢期貨 | 2000 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1906C | NRK52E | 大鼠腎細(xì)胞NRK52E | 1800 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+5%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1907C | OLN93 | 大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞系OLN93 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1908C | ADB106 | 大鼠乳腺癌細(xì)胞ADB106 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1909C | CTX | 大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞CTX | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1910C | CTXTNA2 | 大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞CTXTNA2 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1911C | DITNC1 | 大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞DITNC1 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1912C | 9LlacZ | 大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞9LlacZ | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1913C | C6 | 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6 | 1500 | F12K+2.5%FBS+15HS+1%P/S |
GT1914C | VSC41 | 大鼠脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元瘤VSC4.1 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1915C | IEC18 | 大鼠回腸細(xì)胞IEC18 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+5%FBS+1%P/S+0.01mg/ml胰島素貼壁 |
GT1916C | UMR106 | 大鼠骨肉瘤細(xì)胞UMR106 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%PS |
GT1917C | HSCT6 | 大鼠肝星形細(xì)胞HSCT6 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1918C | NRK49F | 大鼠腎細(xì)胞正常NRK49F | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1919C | BRL | 大鼠肝細(xì)胞BRL | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1920C | BRL3A | 大鼠肝細(xì)胞BRL3A | 1350 | MEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1921C | CBRH7919 | 大鼠肝癌細(xì)胞CBRH7919 | 1500 | 1640+20%FBS+1%P/S |
GT1922C | H4IIEC3 | 大鼠肝癌細(xì)胞H4IIEC3 | 1800 | DMEM+20%馬血清+5%FBS+1%P/S |
GT1923C | RH35 | 大鼠肝癌細(xì)胞RH35 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1924C | NR8383 | 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞NR8383 | 1800 | F12K+15%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S懸浮和貼壁混合 |
GT1925C | GH3 | 大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3 | 1500 | F12K+2.5%FBS+15%HS(馬血清)+1%P/S |
GT1926C | L6 | 大鼠成肌細(xì)胞L6 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1927C | DRG | 大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞DRG | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1928C | RINm5f | 大鼠β胰島素瘤細(xì)胞RINm5f | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1929C | RLE6TN | 大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞RLE6TN | 1800 | 準(zhǔn)備F12培養(yǎng)基;添加ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL;5ng/mL硒)1%,EGF5ng/mL,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 |
GT1930C | CA77 | 大鼠甲狀腺髓樣癌細(xì)胞CA77 | 7500 | DMEM/F12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1931C | IR983F | 大鼠骨髓瘤細(xì)胞IR983F | 2000 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1932C | SHZ88 | 大鼠乳腺癌細(xì)胞SHZ88 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1933C | USMC | 大鼠血管平滑肌細(xì)胞USMC | 1500 | DMEM+10%FBS+10ng/ml成纖維因子貼壁 |
GT1934C | MMQ | 大鼠垂體瘤細(xì)胞MMQ | 2000 | 1640+20%FBS懸浮 |
關(guān)鍵字: 大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3;細(xì)胞GH3;大鼠垂體瘤細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個(gè)蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊(duì),是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛(ài)。本著“服務(wù)、誠(chéng)信、進(jìn)取”的精神,堅(jiān)持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。