小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2,培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢我司客服
凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001)。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時購買完培,同時購買非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。(換液后將瓶蓋擰松)
小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2,培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細(xì)胞密度超80%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),傳代具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2的比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25瓶),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存:
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意佩戴防護(hù)面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項:有些細(xì)胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25),補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2,售后條款:
1)細(xì)胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標(biāo)準(zhǔn)是什么?
1. 細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2. 細(xì)胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,(需提供真實清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2)細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
歡迎新老客戶咨詢訂購:小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2
更多細(xì)胞可以咨詢我司客服:
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GT1865C | NSC34 | 小鼠神經(jīng)元細(xì)胞NSC34 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S半貼壁半懸浮不能出售 |
GT1866C | CTLA4Ig24 | 中國倉鼠卵巢細(xì)胞CTLA4Ig24 | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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GT1869C | AB22 | 小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2 | 2500 | GrowEScellsinMouseESCellBasalMedium(ATCCSCRR-2011)thathasbeensupplementedwiththefollowingcomponents:
0.1mM2-mercaptoethanol(InvitrogenCat.No.21985) 1,000U/mlmouseleukemiainhibitoryfactor(LIF)(EMDMilliporeCat.No.ESG1107) 15%FBS,ESCellQualified(ATCCSCRR-30-2020)
CompleteGrowthMediumforMouseESCellsisstablefor14dayswhenstoredat2°Cto8°C.Thismediumisformulatedforusewitha5%CO2inairatmosphere. |
GT1870C | 2666 | 小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞2666 | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1871C | C1498 | 小鼠急性骨髓性白血病C1498 | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1872C | B16F10OVA(OPT) | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記-OVA雞基因修飾B16F10OVA(OPT) | 6500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%P/S |
GT1873C | SCC7 | 小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞SCC7 | 3000 | DF12+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1874C | GT11 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT11 | 1800 | DF12+5%FBS+5%HS+1%P/S貼壁 |
GT1875C | GT17 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞GT17 | 1800 | DF12+5%FBS+5%HS+1%P/S貼壁 |
GT1876C | DC24 | 小鼠樹突狀細(xì)胞DC2.4 | 5000 | 1640+10%FBS+10ng/mlmurineGM-CSF+1%P/S貼壁 |
GT1877C | MN9D | 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞MN9D | 4500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1878C | CHOK1 | 倉鼠卵巢細(xì)胞CHOK1 | 16000 | DMEM/F12+10%FBS |
GT1879C | HEIOC1 | 小鼠耳蝸毛細(xì)胞HEIOC1 | 5000 | DMEM/F12+10%FBS |
GT1880C | CTLL2 | 小鼠T淋巴細(xì)胞CTLL2 | 4000 | RPMI1640+10%FBS+100U/mlrmIL-2(重組小鼠白介素-2)+1.0μg/mLConA |
GT1881C | E0771 | 小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞E0771 | 1500 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1882C | moc1 | 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc1 | 8000 | IMDM:F10/F12=2:1+10%FBS+5mg/ml胰島素+20ug/500ml氫化可的松+2.5ug/500mlEGF+1%PS |
GT1883C | moc2 | 小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc2 | 25000 | IMDM:F10/F12=2:1+10%FBS+5mg/ml胰島素+20ug/500ml氫化可的松+2.5ug/500mlEGF+1%PS |
GT1884C | min6 | 小鼠胰島β細(xì)胞min6 | 7000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1885C | LA795 | 小鼠肺癌細(xì)胞-腺癌LA795 | 2000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1886C | hep534 | 小鼠肝癌細(xì)胞hep53.4 | 7000 | DMEM(碳酸氫鈉1.5g/L)+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1887C | CMT6461 | 小鼠肺腺癌細(xì)胞CMT6461 | 7500 | 藥企內(nèi)部調(diào)貨成本7500+培養(yǎng)和鑒定 |
GT1888C | MELorMEL745AclDS19 | 小鼠紅白血病細(xì)胞MELorMEL745Acl.DS19 | 1500 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
GT1889C | JAWS2 | 小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2 | 4500 | 1640+20%FBS+5ng/mlGM-CSF+1%P/S懸浮 |
GT1890C | MCA205 | 小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA205 | 4500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ巰基乙醇+1%P/S貼壁 |
GT1891C | YUMM17 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞YUMM1.7 | 3000 | DMEM/F12+10%胎牛血清+1%NEAA+1%P/S |
GT1892C | MC38OVA | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-OVA雞基因修飾MC38OVA | 6500 | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%HEPES+1%P/S |
GT1893C | 15P1 | 小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P1 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1894C | AtT20 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT20 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1895C | cmt93 | 小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞cmt93 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1896C | L6565 | 小鼠白血病細(xì)胞L6565 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S |
GT1897C | CFSC8B | 大鼠永生型肝星狀細(xì)胞CFSC8B | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
GT1898C | AR42J | 大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J | 1500 | F12K+20%FBS+1%P/S |
GT1899C | INS1 | 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS1 | 1500 | 1640+10%FBS+0.05mMβ-巰基乙醇+1%丙酮酸鈉+1%P/S |
GT1900C | RSC96 | 大鼠雪旺細(xì)胞RSC96 | 1350 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
GT1901C | A7r5 | 大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞A7r5 | 1500 | DMEM(含NaHCO31.5g/L)+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S貼壁 |
關(guān)鍵字: 小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2;細(xì)胞JAWS2;小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
上海晶風(fēng)生物科技有限公司擁有一個蓬勃朝氣的年輕團(tuán)隊,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛小熬эL(fēng)生物”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛。本著“服務(wù)、誠信、進(jìn)取”的精神,堅持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。