人胚腎細(xì)胞HEK293T懸浮，培養(yǎng)條件具體詳情可以咨詢(xún)我司客服
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001）。 |
傳代方法 | 第一次建議1:2傳代 | 傳代情況 | 2天換液 |
備注 | 建議同時(shí)購(gòu)買(mǎi)完培，同時(shí)購(gòu)買(mǎi)非常優(yōu)惠 |
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)完全培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好。（換液后將瓶蓋擰松）
人胚腎細(xì)胞HEK293T懸浮，培養(yǎng)步驟
a、細(xì)胞傳代：如果未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細(xì)胞密度超80%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，傳代具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2的比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
b、細(xì)胞凍存：
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細(xì)胞加入1ml的雅吉生物無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細(xì)胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時(shí)以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細(xì)胞復(fù)蘇：
1、從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意佩戴防護(hù)面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細(xì)胞移至含 5ml 完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞貼壁不牢，在運(yùn)輸過(guò)程中容易發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正常現(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
人胚腎細(xì)胞HEK293T懸浮，售后條款：
1）細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？
1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)；
2. 細(xì)胞污染問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi)，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，核實(shí)后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片），重發(fā)；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開(kāi)封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
5. 細(xì)胞活性問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，核實(shí)后予重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照，3天未告知的，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問(wèn)題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的，并跟技術(shù)人員溝通的，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā)。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā)。
2）細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
1. 客戶(hù)造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
2. 客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
3. 非本庫(kù)推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
4. 細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)：人胚腎細(xì)胞HEK293T懸浮
更多細(xì)胞可以咨詢(xún)我司客服：
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| GT1723C | YT | 人NK細(xì)胞白血病細(xì)胞YT | 5000 | 1640+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1724C | 94T778 | 人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞94T778 | 3500 | DMEM+10%FBS+1%PS貼壁 |
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| GT1728C | OCILY10 | 人B細(xì)胞淋巴瘤OCILY10 | 10000 | IMDM+10%FBS+1%P/S懸浮 |
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| GT1732C | Z138 | 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Z138 | 3500 | IMDM+10%FBS+1%P/S懸浮 |
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| GT1734C | SNU620 | 人胃癌細(xì)胞SNU620 | 8000 | 1640+10%FBS+1%PS貼壁+懸浮 |
| GT1735C | sNF962 | 人雪旺細(xì)胞/施萬(wàn)細(xì)胞sNF96.2 | 2500 | DMEM+10%FBS+1%PS貼壁 |
| GT1736C | SKES1 | 人骨肉瘤細(xì)胞SKES1 | 5000 | McCOY's5A+15%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1737C | ECC10 | 人小細(xì)胞胃癌細(xì)胞ECC10 | 12000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1738C | ECC12 | 人小細(xì)胞胃癌細(xì)胞ECC12 | 12000 | 1640+10%FBS++1%P/S貼壁 |
| GT1739C | COV318 | 人卵巢漿液性腺癌細(xì)胞COV318 | 15000 | DMEM+10%FBS+1%PS貼壁 |
| GT1740C | NCCStCK140 | 人胃癌細(xì)胞NCCStCK140 | 12000 | DMEM+10%FBS+1%PS貼壁 |
| GT1741C | HMC1 | 人肥大細(xì)胞HMC1 | 20000 | IMEM+10%FBS+1%P/S懸浮 |
| GT1742C | HEK293穩(wěn)定表達(dá)tTA依賴(lài)性熒光素酶a和aBa瑞司汀2天冬病毒融合基因 | 人胚腎細(xì)胞HEK293穩(wěn)定表達(dá)tTA依賴(lài)性熒光素酶a和aBa瑞司汀2天冬病毒融合基因 | 15000 | MEM+10%FBS+1%F/S貼壁 |
| GT1743C | JHH7 | 人肝癌細(xì)胞JHH7 | 1500 | DMEM/F12+10%FBS+1%PS貼壁 |
| GT1744C | NCIH2342 | 人肺腺癌細(xì)胞NCIH2342 | 10000 |
|
| GT1745C | K1 | 人甲狀腺癌細(xì)胞K1 | 3000 | F12K+10%FBS+1%P/S貼壁 |
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| GT1747C | HCT116OX | 人結(jié)腸癌細(xì)胞耐藥奧沙利鉑HCT116OX | 10000 | McCOY's5A+10%FBS+8ug/mLOxaliplatin+1%P/S貼壁 |
| GT1748C | HT1080CXCR4(h)Puro | 人纖維肉瘤細(xì)胞HT1080CXCR4(h)Puro | 9000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1749C | SVGP12 | 人腦星形膠質(zhì)細(xì)胞SVGP12 | 5000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1750C | KELLYNB19NB19NB19RIKEN | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞KELLYNB19NB19NB19RIKEN | 10000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1751C | SET2 | 成人急性巨核細(xì)胞白血病SET2 | 7500 | 1640+20%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1752C | NCIH1819 | 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1819 | 7500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1753C | HS27A | 人骨髓基質(zhì)成纖維細(xì)胞HS27A | 3000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1754C | KU1919 | 人膀胱癌細(xì)胞KU1919 | 3000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1755C | MESSA | 人子宮肉瘤細(xì)胞MESSA | 3000 | McCOY's5A+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1756C | NCIH1568 | 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCIH1568 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1757C | SSP25 | 人肝膽管癌細(xì)胞SSP25 | 2500 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1758C | RPMI7951 | 人黑色素瘤細(xì)胞RPMI7951 | 8000 | 1640+10%FBS+1%P/S貼壁 |
| GT1759C | HLE | 人肝癌細(xì)胞HLE | 3000 | DMEM+10%FBS+1%P/S貼壁 |
關(guān)鍵字： 人胚腎細(xì)胞HEK293T懸浮;HEK293T懸浮;人胚腎細(xì)胞HEK293T;ATCC細(xì)胞;ATCC官網(wǎng);
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