SKO-007人骨髓瘤細(xì)胞 百歐博偉生物

一、知識(shí)概述

骨髓瘤細(xì)胞是B-淋巴漿細(xì)胞系統(tǒng)惡性增殖所致一種腫瘤。其特點(diǎn)是骨髓中出現(xiàn)異常的漿細(xì)胞 (稱為骨髓瘤細(xì)胞）的惡性增殖，并分泌某 種體液因子，使破骨細(xì)胞異常激活，造成溶骨性病變，引起骨痛和骨質(zhì)破壞，貧血、腎功能損害、免疫功能異常。

二、產(chǎn)品信息

平臺(tái)編號(hào)：Bio-133308

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞信息：SKO-007

細(xì)胞名稱：SKO-007人骨髓瘤細(xì)胞

產(chǎn)品類別：人源細(xì)胞系

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)體系：DMEM（高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

凍存條件：無血清細(xì)胞凍存液保存條件：＞85%

傳代方法：1:2傳代

傳代情況：2~3天換液

培養(yǎng)體系：溫度：37℃ ，氣相：95%空氣 ，5%CO2

細(xì)胞描述：本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。

凍存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO，液氮

注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）

三、細(xì)胞特點(diǎn)

骨髓瘤細(xì)胞具有以下幾個(gè)特點(diǎn)：①穩(wěn)定，易培養(yǎng)；②自身不分泌免疫球蛋白或細(xì)胞因子；③融合率高；④是次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶缺陷株，是制備單克隆抗體的B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)中 最理想的脾細(xì)胞融合伴侶。

四、細(xì)胞收到后的處理方法

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)淖詈棉k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松）

五、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）

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