PL20-BAC/PAC大型質(zhì)粒提取試劑盒(溶液型, 無(wú)內(nèi)毒素, 轉(zhuǎn)染級(jí))
產(chǎn)品介紹:
常規(guī)的離心柱型質(zhì)粒抽提試劑盒并不適用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型質(zhì)粒DNA的抽提。這主要是因?yàn)榇笮唾|(zhì)粒DNA分子量很大,常常會(huì)超過(guò)100kb而且一般拷貝數(shù)低產(chǎn)量低,使用常規(guī)的離心柱吸附膜吸附效率和產(chǎn)量很低而且過(guò)膜會(huì)打斷這些大分子量的質(zhì)粒DNA。本試劑盒采用改進(jìn)堿裂解法從培養(yǎng)菌中提取質(zhì)粒DNA,采用獨(dú)特的溶液配方和內(nèi)毒素清除試劑,只需要幾次簡(jiǎn)單離心去除蛋白質(zhì)、多糖、內(nèi)毒素、RNA等雜質(zhì),獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質(zhì)??芍苯討?yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染甚至動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等對(duì)DNA純度要求很高的工作中。純化后期過(guò)程均在Eppendorf管中操作,方法簡(jiǎn)單,不需特殊設(shè)備,無(wú)需過(guò)柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收細(xì)菌裂解釋放出的質(zhì)粒,不必?fù)?dān)心質(zhì)粒DNA的丟失。本方法提取純化質(zhì)粒DNA,對(duì)質(zhì)粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質(zhì)粒或超大型BAC/PAC質(zhì)粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化。此外溶液型的試劑可以按照比例放大縮小進(jìn)行小提/中提/大提,最后可選擇任意小體積溶解質(zhì)粒,濃度可高達(dá)3μg/μl。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等試劑,也不需要乙醇沉淀??焖?、 方便、從150 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中,可快速提取典型產(chǎn)量30-50μg高純度BAC質(zhì)粒DNA,提取率達(dá)80-90 %。
2.獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于轉(zhuǎn)染、測(cè)序、文庫(kù)等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
3.內(nèi)毒素含量極低(<0.1 EU/μg DNA),可直接應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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