本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診
產(chǎn)品名稱:小鼠可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1)ELISA試劑盒
收集、處理及保存方法應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本水平。用純化抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入抗體，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過 洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。
小鼠可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1)ELISA試劑盒組成
小鼠可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1)ELISA試劑盒操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1、每個(gè)樣本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類，如果要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類x2
2、樣本收集后若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)可保存于2-8°C，若不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)進(jìn)行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復(fù)凍融
3、試劑盒的檢測(cè)范圍不等同于樣本中待測(cè)物的濃度范圍，建議實(shí)驗(yàn)前通過相關(guān)文獻(xiàn)預(yù)估樣本中待測(cè)物的濃度并通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定樣本。
4、血清標(biāo)本采集是應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解是會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色
5、為了保證尿液檢測(cè)的準(zhǔn)確性，必須正確收集尿液標(biāo)本和保存，收集尿液的容器必須要清潔干燥， 使用一次性的容器，避免因用藥并清潔不到而造成的污染，尿液樣本必須新鮮，留取后，應(yīng)及時(shí)檢測(cè)或保存
6、標(biāo)本宜在新鮮是檢測(cè)如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中可能發(fā)生聚合，間接法ELISA中樂視本底加深，
7、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，所以待測(cè)樣本如需多次檢測(cè)，宜少量分裝凍存
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
1.試劑盒保存條件2-8℃。
2. 有效期：6個(gè)月。
關(guān)鍵字： 小鼠可溶性程序性死亡配體1(sPD-L1;(sPD-L1;小鼠可溶性程序性死亡配體1;雅吉檢測(cè)試劑盒;ELISA試劑盒;
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