產(chǎn)品名稱：大鼠肺靜脈內(nèi)皮細胞RPPVEC
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
大鼠肺靜脈內(nèi)皮細胞RPPVEC到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
大鼠肺靜脈內(nèi)皮細胞RPPVEC培養(yǎng)步驟
一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
大鼠肺靜脈內(nèi)皮細胞RPPVEC部分相關細胞如下：
YS2737 HPAEpiC 人肺泡上皮細胞HPAEpiC
YS2738 MLMEC 小鼠微血管內(nèi)皮細胞MLMEC
YS2739 HOP62 人肺癌細胞HOP62
YS2740 MGECs 小鼠腎小球內(nèi)皮細胞MGECs
YS2741 Humanpodocyte 人腎足細胞Humanpodocyte
YS2742 KOPN8 人B淋巴細胞白血病細胞KOPN8
YS2743 MOPC 小鼠少突膠質前體細胞MOPC
YS2744 SIRC 兔角膜上皮細胞SIRC
YS2745 FL62891 人肝細胞FL62891
YS2746 AZ521 人胃癌細胞AZ521
YS2747 MTEC1 小鼠胸腺上皮細胞MTEC1
YS2748 1301 人急性T淋巴細胞白血病細胞1301
YS2749 HEH2 人胚胎心臟成纖維樣細胞HEH2
YS2750 PG13 逆轉錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞PG13
YS2751 HPAEC 人肺動脈內(nèi)皮細胞HPAEC
YS2752 HCC1419 人乳腺導管癌細胞HCC1419
YS2753 HCC1954BL 人外周血B細胞HCC1954BL
YS2754 HR8348 人直腸腺癌細胞（低分化）HR8348
YS2755 HRC99 人直腸腺癌細胞（中分化）HRC99
YS2756 TFK1 人膽管癌細胞TFK1
YS2757 HEMCSS 人軟骨肉瘤細胞HEMCSS
YS2758 mRTEC 小鼠腎小管上皮細胞mRTEC
YS2759 RGCs 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞RGCs
YS2760 ND723 鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞ND723
YS2761 B10BR 小鼠黑素細胞B10BR
YS2762 SW260 人結腸癌細胞SW260
YS2763 HOSEpiC 人卵巢上皮細胞HOSEpiC
YS2764 U373MG 人膠質瘤細胞U373MG
YS2765 HEKA 人表皮角質細胞HEKA
YS2766 PAa 人肺腺癌細胞PAa
YS2767 SNT8 人NK/T細胞淋巴瘤細胞SNT8
YS2768 MN60 人B細胞白血病細胞MN60
YS2769 COLO1 人角質形成層細胞COLO1
YS2770 HPMC 人腹膜間皮細胞HPMC
YS2771 SKNFI 人腦神經(jīng)母細胞瘤細胞SKNFI
YS2772 hRPE 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞hRPE
YS2773 SG231 人膽管上皮癌細胞SG231
YS2774 CCLP1 人膽管癌細胞CCLP1
YS2775 hESC 人子宮內(nèi)膜間質細胞hESC
YS2776 BArT 人食管上皮細胞BArT
YS2777 HIBEC 人肝內(nèi)膽管上皮細胞HIBEC
YS2778 melana 小鼠黑色素細胞melana
YS2779 RBSMC 大鼠腦動脈平滑肌細胞RBSMC
YS2780 LIPF155C 人膽管癌細胞LIPF155C
YS2781 LIPF178C 人膽管癌細胞LIPF178C
YS2782 SW1783 人腦星形膠質瘤細胞SW1783
YS2783 LICCF 人肝內(nèi)膽管癌細胞LICCF
YS2784 HCCLM6 人肝癌細胞HCCLM6
YS2785 ST2 小鼠骨髓基質細胞ST2
YS2786 C8166 人T淋巴細胞白血病細胞C8166
YS2787 HSAEC1KT 人肺小氣道上皮細胞HSAEC1KT
YS2788 L540 人霍奇金淋巴瘤細胞L540
YS2789 rRMECs 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞rRMECs
YS2790 GC9811P 人胃癌腹膜高轉移細胞GC9811P
YS2791 BSC40 非洲綠猴腎細胞BSC40
YS2792 RPPVEC 大鼠肺靜脈內(nèi)皮細胞RPPVEC
YS2793 RASMCs 大鼠氣道平滑肌細胞RASMCs
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