中文名稱:人甲狀腺癌細胞帶熒光素酶KTC-1/LUC | 英文名稱:ktc1/LUC |
品牌: 雅吉生物 | 產(chǎn)地: 上海 |
保存條件: 無血清凍存液 | 純度規(guī)格: 99% |
產(chǎn)品類別: 細胞 細胞系 | |
貨號: YS3161 | 用途范圍: 科研實驗 |
規(guī)格: T25 | 是否進口: 是 |
組織來源: 咨詢客服 | 細胞形態(tài): 貼壁,懸浮 |
物種來源: 咨詢客服 |
產(chǎn)品名稱:人甲狀腺癌細胞帶熒光素酶KTC-1/LUC
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液(貨號:C7001) |
細胞描述 | 本庫的細胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 | ||
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng) |
人甲狀腺癌細胞帶熒光素酶KTC-1/LUC收到貨后處理
細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸?shù)霓k法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作,培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。(注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基)
人甲狀腺癌細胞帶熒光素酶KTC-1/LUC操作步驟
一、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴格無菌操作;將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
三、細胞凍存:(注:無血清凍存液凍存細胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號:C7001)
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、用適量的凍存液重懸細胞,并放置于凍存管中;
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃
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成立日期 | 2011-04-17 (14年) | 注冊資本 | 50.000000萬人民幣 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內(nèi) |
主營行業(yè) | 抗體,抗體 | 經(jīng)營模式 | 試劑,定制,試劑,定制 |
產(chǎn)品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
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¥3500 |
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上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2024-12-25 | |
詢價 |
VIP6年
|
上海弘順生物科技有限公司
|
2024-12-25 | |
¥1500 |
VIP3年
|
上海滬震實業(yè)有限公司
|
2024-12-25 | |
¥3500 |
VIP1年
|
上海晶風(fēng)生物科技有限公司
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2024-12-25 |